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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » C18柱的柱效下降得很厉害，有什么方法可以恢复吗？
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WO要的梦

铁虫 (初入文坛)

[求助] C18柱的柱效下降得很厉害，有什么方法可以恢复吗？ 已有2人参与

最近开始做液相，用C18柱筛选流动相，用过两次含有三乙胺（用量很少）的流动相，还用过两次缓冲液PH为2.5的流动相，每次用甲醇和水冲柱子半小时，然后用甲醇冲半小时封柱。
目前用的是含有缓冲盐PH4.0的流动相，今天做液相的时候，发现药物的出峰时间差距特别大，相邻两次进样的出峰时间相差0.2，出峰时间从8.2依次变成8.4，8.6，8.7，8.9。
应该是柱效变差了，可是这是什么原因造成的呢？是因为使用了三乙胺，还是之前用的PH2.5的缓冲液酸度太大，还是冲柱子时间太短了呢。
另外，目前的情况应该怎么解决呢？我准备用10%的甲醇水溶液冲柱过夜，能改善柱效下降的问题吗。难道只能重新换柱子吗？

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1楼 2016-05-09 23:18:37
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wode1jia2

新虫 (正式写手)
色谱柱是有PH使用范围的，过酸或过碱都会降低柱效……使用缓冲盐，一定要注意用前过渡，用后冲洗……还有就是要平衡时间足够……

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7楼2016-05-13 22:25:03
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mozart13

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看上去像是缓冲盐把柱子堵了 缓冲液有盐离子的话不应该用纯甲醇冲柱子 用水加10%甲醇 低流速 走10到20个柱体积 有温控的话也可注意调节 提高盐离子在洗脱液中的溶解度
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Live, Laugh, Love!
2楼2016-05-10 05:33:06
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月光晒谷

铜虫 (小有名气)
你的色谱柱ph范围是多少？峰形变差了吗，压力升高了吗，塔板数降低了吗，等度还是梯度，个人感觉是不是你平衡时间太短。

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3楼2016-05-10 12:44:51
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WO要的梦

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 月光晒谷 at 2016-05-10 12:44:51
你的色谱柱ph范围是多少？峰形变差了吗，压力升高了吗，塔板数降低了吗，等度还是梯度，个人感觉是不是你平衡时间太短。

PH范围应该是2到8吧，
把柱子冲了一段时间，重新做液相的时候，发现柱子已经恢复正常了，不过确实所需的平衡时间较长。
前一次测定的时候，开始进样的时间应该是早了

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4楼2016-05-12 23:59:59
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