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[交流]
关于大肠杆菌破壁问题，蛋白电泳，上清中没有目的条带 求解
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本人最近构建了，植酸酶的重组菌株，载体为pET28a，表达菌株是BL21（de3） 问题是诱导表达后的菌株，全细胞跑蛋白电泳有目的条带，但是细胞破碎后，上清中没有目的条带，沉淀中有。 先问下是什么原因，是没有破开还是形成包涵体了？ IPTG诱导浓度为1mM，od 2，诱导24h，请大神解答，谢谢了 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2016-05-08 21:32:24
xuweitao
铁杆木虫 (著名写手)
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3楼2016-05-09 09:49:32
4楼2016-05-09 14:11:51
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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| 估计是形成包涵体了，包涵体你先跑一下看是否有结果，包涵体要先变性在复性，操作比较困难，或结果不一定是好的，具体的包涵体复性步骤及实验FAQ，可以访问：http://www.detaibio.com/topics/inclusion-body-refolding-introduction.html |
5楼2016-05-09 17:53:11
hc-material
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6楼2016-05-12 09:31:36
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