[交流] 关于大肠杆菌破壁问题，蛋白电泳，上清中没有目的条带 求解

3楼: Originally posted by xuweitao at 2016-05-09 09:49:32
上清中有e coli其他蛋白的带吧？ 如果那样应该就是你的蛋白在包涵体。

可以尝试降低诱导温度，降iptg浓度。 另外你诱导时菌浓应该过了。。。

4楼: Originally posted by 守望海贝 at 2016-05-09 14:11:51
加诱导剂时，菌液OD600的值应该是0.6左右，你的诱导时间有点长哇，我一般诱导4-5h。如果这样子表达的蛋白还是在沉淀里，应该就是包涵体表达了，那就只能将包涵体蛋白变性、复性后再纯化

6楼: Originally posted by hc-material at 2016-05-12 09:31:36
没破开和形成包涵体的可能都有可能，你怎么破碎的也没说啊。形成包涵体的可能性更大一些。若包涵体，可以尝试低温诱导，比如25度，20度等。
没破开就重新找破开的条件。
后续若纯化，还是先尝试可溶性表达吧，若不 ...