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构建shRNA慢病毒，引物退火程序怎么设定？已有1人参与
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构建shRNA慢病毒，引物退火程序怎么设定？求帮助，50bp左右的两个互补单链引物如何退火形成双链，求具体的程序。 自己在文献查到到的如下，不知道可不可以，有问题吗？ 用ddH2O 稀释引物，使终浓度为100μM。分别吸取10μl 的上下游引物混合并吹打均匀放入PCR 管内进行退火，程序如下： 95℃ 30 s，72℃ 2 min，37℃ 2 min，25℃ 2 min。 请做过的同志们帮帮忙，具体的体系和程序该怎么设定，需要什么离子之类的吗？第一次接触，实验室无相关经验，急切求帮助。 |
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