| 查看: 1775 | 回复: 1 | ||
[求助]
pSG5质粒进行BamHI和BglII双酶切如何酶切完全？ 已有1人参与
|
|
pSG5质粒上EcorI、BamHI和BglII三个酶切位点是连在一起的，GAATTCGGATCCAGATCT，现在我要做BamHI和BglII双酶切，用的NEB的内切酶双酶切2h，之后用T4 连接酶连接后得到的大量空载质粒，挑了16个菌都是空载，所以怀疑是不是由于酶切位点连在一起，对双酶切有影响，导致酶切不完全？不过，我也有怀疑T4连接体系配置有问题 看了论坛资料后说可以分别单酶切，把需要保护碱基长一点的酶先切，然后再切保护碱基短一点的，查到NEB这两个酶的保护碱基是这样的，好像如果只剩一个残基情况下都比较难切，请问这种情况下怎么办比较好呢？  求大侠赐教啊 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有192人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
kangaroo0513
新虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 154 (高中生)
- 金币: 2277.4
- 散金: 100
- 红花: 29
- 帖子: 464
- 在线: 119.4小时
- 虫号: 2621902
- 注册: 2013-08-28
- 专业: 细胞物质运输
2楼2016-05-07 21:23:52