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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » Smal和sal 一个平末端一个粘性末端，与载体一直链接不上
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Becky0719

新虫 (初入文坛)

[求助] Smal和sal 一个平末端一个粘性末端，与载体一直链接不上 已有2人参与

我的载体是pcv—mGFP，用smal.,sal两个酶切位点，切出来的的条带很亮，也没有其他杂带，做链接转化大肠杆菌，就一直没长，什么都没长，应该就是不存在没链接上吧。应该就只是链接不上。都做了1个月了，求各位大神帮帮忙。

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1楼 2016-05-06 13:13:37
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_任小二

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.可能是你的回收片段含量还是少；
2.可以把回收片段做一些纯化处理。
希望有所帮助。
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3楼2016-06-26 16:35:43
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试平端连接试剂盒，比如Fermentas的T4 DNA Ligase（EL0014），里用PEG4000溶液促进平末端连接
赞一下 回复此楼
2楼2016-05-07 10:36:02
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