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Becky0719

新虫 (初入文坛)

[求助] Smal和sal 一个平末端一个粘性末端,与载体一直链接不上 已有2人参与

我的载体是pcv—mGFP,用smal.,sal两个酶切位点,切出来的的条带很亮,也没有其他杂带,做链接转化大肠杆菌,就一直没长,什么都没长,应该就是不存在没链接上吧。应该就只是链接不上。都做了1个月了,求各位大神帮帮忙。

发自小木虫IOS客户端
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试试平端连接试剂盒,比如Fermentas的T4 DNA Ligase(EL0014),里用PEG4000溶液促进平末端连接
2楼2016-05-07 10:36:02
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_任小二

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.可能是你的回收片段含量还是少;
2.可以把回收片段做一些纯化处理。
希望有所帮助。
3楼2016-06-26 16:35:43
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