24小时热门版块排行榜    

查看: 789  |  回复: 8
当前主题已经存档。

shzdx

银虫 (初入文坛)

[交流] 求助蛋白纯化

我是初次做蛋白纯化工作,用sephadex G-50,缓冲液用0.9%的氯化钠,想进一步做液相色谱,但现在有一个问题,低温冻干后出现大量的盐,也不知道对我的目的蛋白有没有影响,请问各位高手,在低温冻干前能不能做一下除盐工作(我的目的蛋白4.8kD)。我听实验室的师兄说可以先用丙酮沉淀一下,不知道有没有人做过相应的工作。请高手赐教。谢谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:10 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanjun80

金虫 (正式写手)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
1, 分子筛层析可以除盐;
2, 除盐也可以用半透膜透析;
3, 丙酮会使蛋白变性(除非是非常低的温度),除盐效果也不好。
我笃信:人定胜天!
2楼2008-10-28 12:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiying11099

木虫 (著名写手)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
看你的蛋白最后要做什么用途。如果crystalize就需要用柱子除盐,过FPLC也可以。
一般我在冻蛋白之前先除好盐。
3楼2008-10-28 13:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿

学习了
头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒,哥一直帅的很低调,仰角45°深深陶醉中....
4楼2008-10-28 14:17:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfebst

至尊木虫 (职业作家)

最好用脱盐柱脱盐,呵呵
我也用凝胶过滤脱过盐
5楼2008-10-28 15:55:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zengfuxing

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
shzdx(金币+5,VIP+0):谢谢你,
4.8kDa的蛋白根据我的经验脱盐柱效果不是很好。
我用的是透析袋,截留分子量1kDa的,生工就有卖。
感觉效果很好,丙酮沉淀不推荐。
6楼2008-10-28 17:46:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿

学习了
头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒,哥一直帅的很低调,仰角45°深深陶醉中....
7楼2008-11-10 13:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WLFeng

银虫 (初入文坛)

缓冲液用PBS
8楼2009-04-22 21:47:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

为什么非要冻干?0.9%的氯化钠其实盐浓度不算高
9楼2009-04-23 08:15:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shzdx 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂 +5 zhn03 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:58 by peike
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 271求调剂 +4 生如夏花… 2026-03-22 4/200 2026-03-25 11:25 by userper
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 求调剂材料学硕080500,总分289分 5+3 @taotao 2026-03-19 21/1050 2026-03-23 10:17 by 冠c哥
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见