24小时热门版块排行榜    

查看: 768  |  回复: 8
当前主题已经存档。

shzdx

银虫 (初入文坛)

[交流] 求助蛋白纯化

我是初次做蛋白纯化工作,用sephadex G-50,缓冲液用0.9%的氯化钠,想进一步做液相色谱,但现在有一个问题,低温冻干后出现大量的盐,也不知道对我的目的蛋白有没有影响,请问各位高手,在低温冻干前能不能做一下除盐工作(我的目的蛋白4.8kD)。我听实验室的师兄说可以先用丙酮沉淀一下,不知道有没有人做过相应的工作。请高手赐教。谢谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-2 at 15:10 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanjun80

金虫 (正式写手)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
1, 分子筛层析可以除盐;
2, 除盐也可以用半透膜透析;
3, 丙酮会使蛋白变性(除非是非常低的温度),除盐效果也不好。
我笃信:人定胜天!
2楼2008-10-28 12:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiying11099

木虫 (著名写手)

★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 ~~
看你的蛋白最后要做什么用途。如果crystalize就需要用柱子除盐,过FPLC也可以。
一般我在冻蛋白之前先除好盐。
3楼2008-10-28 13:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿

学习了
头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒,哥一直帅的很低调,仰角45°深深陶醉中....
4楼2008-10-28 14:17:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfebst

至尊木虫 (职业作家)

最好用脱盐柱脱盐,呵呵
我也用凝胶过滤脱过盐
5楼2008-10-28 15:55:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zengfuxing

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
shzdx(金币+5,VIP+0):谢谢你,
4.8kDa的蛋白根据我的经验脱盐柱效果不是很好。
我用的是透析袋,截留分子量1kDa的,生工就有卖。
感觉效果很好,丙酮沉淀不推荐。
6楼2008-10-28 17:46:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿

学习了
头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒,哥一直帅的很低调,仰角45°深深陶醉中....
7楼2008-11-10 13:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WLFeng

银虫 (初入文坛)

缓冲液用PBS
8楼2009-04-22 21:47:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

为什么非要冻干?0.9%的氯化钠其实盐浓度不算高
9楼2009-04-23 08:15:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shzdx 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见