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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[求助] 从这个质粒图上看,想用XbaI做酶切位点的话,设计引物是不是要补两个碱基? 已有2人参与

从这个质粒图上看,想用XbaI做酶切位点的话,设计引物是不是要补两个碱基?

质粒融合表达部分的序列

我想用EcoRI和XbaI做酶切位点
EcoRI是不是需要在我设计的引物的GAATTC后面补一个碱基,再加我的目的基因呢?

还有后面的XbaI,为什么要设计成这个样子,这样的话要想表达出后面的his标签,是不是需要在TCTAGA前面补两个碱基?


但是我一个师姐完全没管后面的XbaI,直接按照表达的氨基酸设计的引物序列,也就是目的基因是三的倍数
然后过镍柱也纯化出来了?所以说到底加不加碱基也搞不懂了···

望了解的朋友赐教!非常感谢
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kungfu2016

新虫 (正式写手)

你将XhoI位点前6个碱基到EAEA的序列做引物克隆到的蛋白序列前面,用XhoI和XbaI切连,应该没有问题的

发自小木虫Android客户端
5楼2016-05-03 23:16:04
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