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xscljl

银虫 (初入文坛)

[交流] ELISA检测背景高

利用间接ELISA系统检测A与B两个蛋白相互作用,我是用A蛋白进行包被,利用特异性抗体检测B蛋白的多少,表明A与B蛋白的相互作用的强弱。但是,发现如果不包被A蛋白的话,其它封闭等步骤与前述没什么分别,这组处理的OD值约为包被A蛋白的OD值的1/2,不知道这是什么原因?。如果我想把这个值再降低,不知道如何操作?
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果除去封闭不完全,那就有可能存在非特异性结合!
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
2楼2016-05-17 21:15:23
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
B蛋白分子量可能比较小,封闭剂封不住或者和封闭剂有反应。以前遇到过这种情况,两种方案可供选择。A更换封闭剂,BSA,脱脂奶粉,酪蛋白,还有一些商业化非蛋白类封闭剂。B更换酶标板条类型,疏水换亲水,或者反之,一些极端的蛋白疏水板条和亲水板条包被的效果会差很多

发自小木虫Android客户端
3楼2016-05-17 21:48:50
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