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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 用什么方法浓缩DNA,后续还需要电转 已有16人参与

浓缩DNA的方法有哪些,损失量最少还可以用于电转

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)


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抽真空挥发
或者直接放在超净台自然蒸发
2楼2016-04-29 18:22:32
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卡维斯

金虫 (正式写手)

真空干燥仪,抽真空干燥:37度室温或烘箱干燥。
3楼2016-04-29 21:22:26
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i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-29 21:22:26
真空干燥仪,抽真空干燥:37度室温或烘箱干燥。

DNA浓缩,放在烘箱,温度多少,打开还是密闭离心管盖子进行干燥,这种方法会降解DNA吗?

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4楼2016-04-30 09:27:38
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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5楼2016-04-30 18:53:36
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robinletter

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
直接蒸发,有可能会导致DNA水解,应该采用乙醇沉淀DNA,然后再37度烘箱里干燥;以下是丁香通上的一个方法:

http://www.biomart.cn/experiment/430/431/434/31585.htm
乙醇沉淀DNA实验操作方法

关键词: 乙醇 沉淀 DNA  2012-02-16 09:23 来源:互联网 点击次数:6030  


1. 加入 1/10 体积的乙酸钠(3 mol/L ,PH=5.2)于 DNA 溶液中充分混匀,使其 最终浓度为 0.3 mol/L;

2. 加入 2 倍体积用冰预冷的乙醇混合后再次充分混匀置于- 20℃中 15~30 分钟;

3. 12,000 g 离心 10 分钟,小心移出上清液,吸去管壁上所有的液滴;

4. 加入 1/2 离心管容量的 70%乙醇,12000g 离心 2 分钟,小心移出上清液,吸去管壁上所有的液滴;

5. 于室温下将开盖的 EP 管的置于实验桌上以使残留的液体挥发至干;

6. 加适量的 ddH2O 溶解 DNA 沉淀。
6楼2016-04-30 20:59:02
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kungfu2016

新虫 (正式写手)

7楼2016-05-01 14:10:49
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i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by kungfu2016 at 2016-05-01 14:10:49
冷冻干燥

怎么冷冻干燥,用什么仪器

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8楼2016-05-01 15:21:24
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Liumengya

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
冷冻干燥机干燥,很快的

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9楼2016-05-01 21:39:40
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i760912798

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Liumengya at 2016-05-01 21:39:40
冷冻干燥机干燥,很快的

没有冷冻干燥机怎么办

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10楼2016-05-01 21:47:31
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