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i760912798

木虫 (正式写手)

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[交流] 用什么方法浓缩DNA，后续还需要电转已有16人参与

浓缩DNA的方法有哪些，损失量最少还可以用于电转

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1楼 2016-04-29 16:53:18

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robinletter

铜虫 (正式写手)

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★
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直接蒸发，有可能会导致DNA水解，应该采用乙醇沉淀DNA，然后再37度烘箱里干燥；以下是丁香通上的一个方法：

http://www.biomart.cn/experiment/430/431/434/31585.htm
乙醇沉淀DNA实验操作方法

关键词：乙醇沉淀 DNA 2012-02-16 09:23 来源：互联网点击次数：6030

1. 加入 1/10 体积的乙酸钠（3 mol/L ，PH=5.2）于 DNA 溶液中充分混匀，使其最终浓度为 0.3 mol/L；

2. 加入 2 倍体积用冰预冷的乙醇混合后再次充分混匀置于- 20℃中 15~30 分钟；

3. 12,000 g 离心 10 分钟，小心移出上清液，吸去管壁上所有的液滴；

4. 加入 1/2 离心管容量的 70％乙醇，12000g 离心 2 分钟，小心移出上清液，吸去管壁上所有的液滴；

5. 于室温下将开盖的 EP 管的置于实验桌上以使残留的液体挥发至干；

6. 加适量的 ddH2O 溶解 DNA 沉淀。