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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 用什么方法浓缩DNA，后续还需要电转
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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 用什么方法浓缩DNA，后续还需要电转 已有16人参与

浓缩DNA的方法有哪些，损失量最少还可以用于电转

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1楼 2016-04-29 16:53:18
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
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抽真空挥发
或者直接放在超净台自然蒸发
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2楼2016-04-29 18:22:32
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卡维斯

金虫 (正式写手)
真空干燥仪，抽真空干燥：37度室温或烘箱干燥。
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3楼2016-04-29 21:22:26
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i760912798

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-29 21:22:26
真空干燥仪，抽真空干燥：37度室温或烘箱干燥。

DNA浓缩，放在烘箱，温度多少，打开还是密闭离心管盖子进行干燥，这种方法会降解DNA吗？

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4楼2016-04-30 09:27:38
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
5楼2016-04-30 18:53:36
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robinletter

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接蒸发，有可能会导致DNA水解，应该采用乙醇沉淀DNA，然后再37度烘箱里干燥；以下是丁香通上的一个方法：

http://www.biomart.cn/experiment/430/431/434/31585.htm
乙醇沉淀DNA实验操作方法

关键词： 乙醇 沉淀 DNA  2012-02-16 09:23 来源：互联网 点击次数：6030  


1. 加入 1/10 体积的乙酸钠（3 mol/L ，PH=5.2）于 DNA 溶液中充分混匀，使其 最终浓度为 0.3 mol/L；

2. 加入 2 倍体积用冰预冷的乙醇混合后再次充分混匀置于- 20℃中 15~30 分钟；

3. 12,000 g 离心 10 分钟，小心移出上清液，吸去管壁上所有的液滴；

4. 加入 1/2 离心管容量的 70％乙醇，12000g 离心 2 分钟，小心移出上清液，吸去管壁上所有的液滴；

5. 于室温下将开盖的 EP 管的置于实验桌上以使残留的液体挥发至干；

6. 加适量的 ddH2O 溶解 DNA 沉淀。
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6楼2016-04-30 20:59:02
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kungfu2016

新虫 (正式写手)
冷冻干燥

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7楼2016-05-01 14:10:49
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i760912798

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kungfu2016 at 2016-05-01 14:10:49
冷冻干燥

怎么冷冻干燥，用什么仪器

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8楼2016-05-01 15:21:24
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Liumengya

木虫 (正式写手)
★
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冷冻干燥机干燥，很快的

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9楼2016-05-01 21:39:40
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i760912798

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Liumengya at 2016-05-01 21:39:40
冷冻干燥机干燥，很快的

没有冷冻干燥机怎么办

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10楼2016-05-01 21:47:31
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