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kingjazz23

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[求助] 关于DNA序列上的酶切位点问题已有1人参与

最近在构建载体，将找好的目的基因序列插入载体中，发现有时候将DNA序列complete reverse之后，酶切位点也会发生变化，与没有reverse时之前的不同，我想问问在这样的情况下，怎样选择酶切位点？是不是要将两种情况的酶切都排除了，选择序列上没有的酶切位点？还有就是想问一下DNA序列reverse之后，转录和翻译出来的蛋白和之前的是同一种吗？

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1楼 2016-04-28 14:10:33

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stone2239

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

载体上序列转录、翻译是有方向的，你插入正向序列与插入反向互补序列结果肯定不同。一般限制性内切酶的识别切割位点都是回文序列，应该不会出现正反链酶切位点信息不一致的情况。把序列贴上来看下。

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2楼2016-04-28 18:43:54

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kingjazz23

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-28 18:43:54
载体上序列转录、翻译是有方向的，你插入正向序列与插入反向互补序列结果肯定不同。一般限制性内切酶的识别切割位点都是回文序列，应该不会出现正反链酶切位点信息不一致的情况。把序列贴上来看下。

我说的complete reverse不是指反向互补连而是指我用DNA star的Editseq把原本的序列倒转个方向就是头尾对调不是指互补连

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3楼2016-04-28 23:17:01

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