【答案】应助回帖

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1楼2016-04-25 16:07:49

许彦

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基线设置没有弄好。

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2楼2016-04-26 07:46:36

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2楼: Originally posted by 许彦 at 2016-04-26 07:46:36
基线设置没有弄好。

那荧光信号为什么会下降呢，按常理不是应该反应随反应时间增强的吗？

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3楼2016-04-26 09:08:19

许彦

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哪里有下降，这个是基线设置问题，你把基线设置好了就可以了，

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4楼2016-04-26 10:52:19

小魔医

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4楼: Originally posted by 许彦 at 2016-04-26 10:52:19
哪里有下降，这个是基线设置问题，你把基线设置好了就可以了，

这次是改变了预反应的时间，没有调整基线呀，然后就没下降了，不太懂，

212.png

5楼2016-04-26 21:44:43

小魔医

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4楼: Originally posted by 许彦 at 2016-04-26 10:52:19
哪里有下降，这个是基线设置问题，你把基线设置好了就可以了，

预反应时间之前是用的30S，因为试剂盒上说试剂盒内的酶预反应30S就够了，第二次的图片是用了常规的5分钟，这个会影响曲线吗？而且探针法的平台期是不是都不是很明显呀？我做的都没有别人燃料法那么明显的平台期，不好意思，问题有点多\(^o^)/~

6楼2016-04-26 21:49:13

许彦

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6楼: Originally posted by 小魔医 at 2016-04-26 21:49:13
预反应时间之前是用的30S，因为试剂盒上说试剂盒内的酶预反应30S就够了，第二次的图片是用了常规的5分钟，这个会影响曲线吗？而且探针法的平台期是不是都不是很明显呀？我做的都没有别人燃料法那么明显的平台期，不 ...

可能会有影响，时间长一点，酶可能更早的开始工作了，所以前几个循环很稳定，再就是关于探针法是有平台期的，好的试剂平台期非常好看，这个一般和引物有关系。

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