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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒pcr
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒pcr 已有1人参与

我的目的基因是1814bp，以质粒为模板扩增之后电泳，之后出现的条带是2000多，

质粒pcr


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1楼 2016-04-24 23:29:49
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2016-04-25 07:42:41
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黄启秀

新虫 (正式写手)
是T载么  用的是通用引物么  如果是的话 是会多出100-200bp

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3楼2016-04-25 08:38:01
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 黄启秀 at 2016-04-25 08:38:01
是T载么  用的是通用引物么  如果是的话 是会多出100-200bp

是T载体pMD-19t. 用的是不是通用引物，是特异性引物，因为之前阳性菌验证用特异引物扩不出来，又换通用引物扩出来了，但是提出来的质粒送去测序，结果是测序停止，测序无信号，我才又用特异引物又扩了一次

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4楼2016-04-25 12:18:50
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tbsjxy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用什么引物扩出来2000多，楼主既然连载体测序就用通用引物测呀，很可能是没连接上才没信号。
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该用户由于违规已被禁言一辈子
5楼2016-04-25 16:13:21
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kingjazz23

金虫 (小有名气)
如果是用通用引物出现2000多还是可以理解的 但是你用的是特异性引物  可能是退火温度的问题

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6楼2016-04-28 23:54:17
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