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双酶切后连接，一直失败 已有3人参与
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1.质粒上有两个相邻的酶切位点，分别是EcoR1、EcoRV，那么这两个位点可以切的开吗？我双酶切了一周，一直没有切开。 2.T载体上已经连接了一个400bp的片段A，片段A两端分别有EcoRV和Hind3，构建为A—T，现在用 EcoRV和 EcoR1双酶切A—T(两个酶切位点间隔31bp)，然后再连接600bp左右的片段B，可是转化后菌液PCR一直克隆的是A—T上的片段，感觉好像没有连上B。 我重复了很多次，每次的转化子都是这样的情况，希望大神们给予帮助 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2016-04-25 07:45:23
3楼2016-04-25 11:12:02
原海亮
木虫 (著名写手)
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