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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » Tricine-SDS-PAGE操作心得
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匿名

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1楼 2016-04-23 14:05:32
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小研来报到

金虫 (小有名气)
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你好，我的目的蛋白大概在14KD，用SDS—PAGE电泳（15%的分离胶），到了下面蛋白就有点糊，也不好鉴定，老师就叫我找跑小蛋白的Tricine—SDS—PAGE电泳，实验室只有SDS—PAGE电泳仪器和试剂，Tricine—SDS—PAGE电泳的仪器装置是和SDS—PAGE电泳仪器装置一样吗？谢谢！
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2楼2016-05-16 10:24:35
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匿名

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3楼2016-05-16 21:37:41
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小研来报到

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3楼: Originally posted by mengfei8336 at 2016-05-16 21:37:41
我跑11.8KDa的蛋白用普通的SDS-PAGE完全没问题，所以你14KDa的也应该可以啊，15%的分离胶就好。我的建议是，如果能用SDS-PAGE做好的，就没必要做Tricine—SDS—PAGE，当然你也尝试一下，就能理解我的建议了。你从生 ...

我跑的是细胞超声破碎的上清和沉淀，到了下面条带比较糊，不单一，我怀疑是不是蛋白比较小的原因，那用Tri-sds-page能解决这个问题吗？

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4楼2016-05-16 23:52:03
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030Selma

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蛋白分子量在粗略的电泳中本来就只是预测，而且你保证marker跟样品的体系都是一样的吗？

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5楼2016-05-17 00:27:02
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匿名

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6楼2016-05-17 18:17:23
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6楼: Originally posted by mengfei8336 at 2016-05-17 18:17:23
用Tri-sds-page可以解决这个问题，条带不会弥散，不过小分子蛋白电泳可不好做呀，不是按照操作流程就一定能够得到预期的目标，你先尝试做下吧。
其实电泳也是一门技术，需要不断练习的，不过很多研究生都没有时间 ...

谢谢

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7楼2016-05-17 19:36:51
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