应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 同一个基因PCR结果显示对照组有单一的目标条带，两个处理组都有两个条带
51/1返回列表
查看: 2032  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wrsdaw

新虫 (初入文坛)

[求助] 同一个基因PCR结果显示对照组有单一的目标条带，两个处理组都有两个条带 已有1人参与

求助各位大神：
   我想对几个基因在处理后的表达进行荧光定量，RNA经反转录获得cDNA后进行了PCR,其中有一个基因的PCR结果显示在对照组里有单一的目标条带（约200bp），而处理组除了目标条带还出现了一条更长的条带（约500bp），请问会是什么原因造成的呢？针对该基因的两对引物都出现了同样的情况，此外还知道该基因在处理中被上调了。谢谢各位大神，多多给宝贵的意见。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-04-22 23:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wrsdaw: 金币+5 2016-04-25 20:43:00
引用回帖:
5楼: Originally posted by wrsdaw at 2016-04-23 15:38:09
谢谢，如果是可变剪切的话，怎么来设计引物做荧光定量呢，是否测序后再来设计呢，谢谢...

测序后再设计，其中一条引物设在可变剪接区。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2016-04-23 16:10:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

langzian

木虫 (正式写手)
亲，提问要说详细点，你的处理是怎么处理的，敲除还是插入，或者别的，插入就很容易理解，敲除这种情况也是有可能出现的，但是两个组都出现这种情况就不多了，建议你把片段送去测序看看

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
江山
2楼2016-04-22 23:37:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wrsdaw

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by langzian at 2016-04-22 23:37:36
亲，提问要说详细点，你的处理是怎么处理的，敲除还是插入，或者别的，插入就很容易理解，敲除这种情况也是有可能出现的，但是两个组都出现这种情况就不多了，建议你把片段送去测序看看
...

大神，不好意思我现在补充一下，我的处理不是敲除和插入，是药物处理植物后提取RNA，通过转录组测序发现该基因上调了，所以针对该基因设计了两对引物进行验证实验，反转录后PCR结果在对照组里得到了目的基因条带，可是两个药物处理组都处理除了目标条带还有一条bp更大的条带，用同样的转录后的cDNA，其他几个基因都没有问题
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-23 00:11:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是可变剪接，有的可变剪接是受诱导的。建议把PCR产物两条带都测序看一下。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2016-04-23 13:07:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 13/650 2026-08-09 19:04 by 天神眷顾
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +3 布布和一二 2026-08-08 3/150 2026-08-08 18:15 by Lightingo
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭