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主爵

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于液相方面的问题,继上贴。。 已有3人参与

楼主初做液相,想摸出一个合适的流动相比例条件,文献报道是45:55,当时测出来的时候发现峰很高,但是没有文献里的那样好,因为在2分多钟就出了。。。然后为了检测这些很早出来的峰是不是我要的峰,我就把它稀释了十倍,发现峰高下降,信噪比也降了(但没有按十倍的降),后来又稀释10倍,更低。。。之后我就开始改流动相比例,结果发现改掉以后同样时间出了同一个峰,峰高,时间一模一样!!!当时就蒙蔽了,唉,求问这是什么原因…………流动相是甲醇和0.2%磷酸溶液,样品溶剂是甲醇,检测波长350nm,跪谢!!!下面是图谱。。。。还有个问题,文献报道是45:55,我原来在高浓度的时候测过,并不能像他们那样得出好的峰,现在这个情况还有必要再在低浓度下用45:55测么

关于液相方面的问题,继上贴。。
流动相:甲醇:0.2%磷酸(2:8)检测波长350nm,样品浓度0.01mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-1
流动相:甲醇:0.2%磷酸(2:8)检测波长350nm,样品浓度0.001mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-2
流动相:甲醇:0.2%磷酸(7:3)检测波长350nm,样品浓度0.001mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-3
流动相:甲醇:0.2%磷酸(1:1)检测波长350nm,样品浓度0.001mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-4
流动相:甲醇:0.2%磷酸(1:1)检测波长350nm,样品浓度0.01mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-5
流动相:甲醇:0.2%磷酸(2:8)检测波长350nm,样品浓度0.001mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-6
流动相:甲醇:0.2%磷酸(2:8)检测波长350nm,样品浓度0.01mg/ml


关于液相方面的问题,继上贴。。-7
流动相:甲醇:0.2%磷酸(2:8)检测波长350nm,样品为纯甲醇,溶剂@lifeliuyan
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主爵

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-04-22 17:32:18
好详细的一个问题!图文并茂!你这个是做一个样品的分析还是一个对照品的分析呢?
从你的图谱看,甲醇:0.2%磷酸(2:8),样品是没有保留的,所以你应该提高水的比例,而不是提高甲醇的比例,还有一个问题就是,你 ...

我一开始用的0.1mg/ml的,跑出来很高也是这个时间段,是标准品,槲皮苷

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3楼2016-04-22 17:56:39
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品,天然产物分离纯化


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
好详细的一个问题!图文并茂!你这个是做一个样品的分析还是一个对照品的分析呢?
从你的图谱看,甲醇:0.2%磷酸(2:8),样品是没有保留的,所以你应该提高水的比例,而不是提高甲醇的比例,还有一个问题就是,你最好把全波长都打开,可能你的样品在350nm下吸收很弱,感觉都没看到明显的样品峰,另外就是把进样浓度增大,先把主峰找到才好进一步摸方法
2楼2016-04-22 17:32:18
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主爵

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-04-22 17:32:18
好详细的一个问题!图文并茂!你这个是做一个样品的分析还是一个对照品的分析呢?
从你的图谱看,甲醇:0.2%磷酸(2:8),样品是没有保留的,所以你应该提高水的比例,而不是提高甲醇的比例,还有一个问题就是,你 ...

以前用紫外扫过全波长,350nm吸收挺高的

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-22 18:06:27
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txg250

新虫 (正式写手)

我觉得你应该调整流动相的比例,出峰时间太早了,应该把甲醇的比例提高,把峰往后拖,延长出峰时间,因为液相是反相系统,极性大的物质先出峰,极性小的后出峰,物质的极性不变,流动相的极性会影响出峰时间,不到2分钟出峰,说明流动相极性太大,降低流动相极性是对的,二楼的兄弟说2:8不保留的原因是极性太大了,一下子都冲出来了,所以一定要降低流动相的极性,即提高甲醇的比例,你试试

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5楼2016-04-23 19:24:47
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