24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4093)
>导师招生 (737)
>论文投稿 (402)
>硕博家园 (221)
>休闲灌水 (220)
>文献求助 (201)
>虫友互识 (151)
>考博 (145)
>新药研发 (98)
>学术会议 (93)
>公派出国 (87)
>考研 (79)
>基金申请 (72)
>招聘信息布告栏 (69)
>博后之家 (56)
>论文道贺祈福 (55)

返回列表

cys452008

金虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1324.6
红花: 1
帖子: 97
在线: 72.5小时
虫号: 3824499
注册: 2015-04-21
专业: 无机纳米化学

[求助] 关于DNA生物传感器已有3人参与

本人小白一个，现在老板让做DNA传感，之前实验室也没人做过，所以好多不懂的地方，自己先从比较原始的开始入手，准备在金上修饰带巯基的ss-DNA，然后用亚甲基蓝做电化学指示剂，杂交检测DNA，现在我有这样几个问题，还望各位大神不吝赐教！感激不敬！
1.修饰完成后，如果采用DPV检测的话，需要有什么步骤吗？因为我之前自己尝试的，每次DPV扫的都不一样，前一次和后一次都在变化线都不能重合，在测DPV前需要通氮除氧，或者扫个CV稳定一下吗？
2.当这组实验结束之后，电极需要洗净打磨，然后重新修饰还是有什么其他办法直接保留基地去除上面的东西？如果需要，我有一个问题，我怎么保证每次实验所得到的峰位置在一起，因为感觉，虽然修饰的量什么都是一样的，但总会有差别，我如何确保不同组实验之间数据具有可比性，因为以前做过葡萄糖过氧化氢这类的传感，这些可以直接加到缓冲液中，可以直接看到变化，但DNA杂交时间长，而且不是立即就能直观看到结果，所以我怎么确定之后的位置都在一起？
3.还有就是各位前辈在做这个的时候有什么小技巧，或需要注意的点也可以说。

真的非常感谢，自己一个人摸索真的挺痛苦的，还是希望有经验的虫友可以分不吝赐教，谢谢！@langzhizhou@louderbe

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2016-04-16 00:10:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

olea

专家顾问 (著名写手)

专家经验: +513
应助: 369 (硕士)
贵宾: 0.371
金币: 17697.7
红花: 89
帖子: 2364
在线: 1890.1小时
虫号: 210547
注册: 2006-03-07
专业: 电化学
管辖: 电化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cys452008(langzhizhou代发): 金币+20 2016-07-26 00:28:10

1.修饰完成后，如果采用DPV检测的话，需要有什么步骤吗？因为我之前自己尝试的，每次DPV扫的都不一样，前一次和后一次都在变化线都不能重合，在测DPV前需要通氮除氧，或者扫个CV稳定一下吗？
用缓冲溶液浸泡几分钟，洗掉不牢的部分。DPV比较灵敏，不像CV那么稳定，不能重合没关系，重复测多次，根据基线取峰值然后取平均值。MB的反应应该跟氧没啥反应，不需要除氧，扫CV也不用。
2.当这组实验结束之后，电极需要洗净打磨，然后重新修饰还是有什么其他办法直接保留基地去除上面的东西？如果需要，我有一个问题，我怎么保证每次实验所得到的峰位置在一起，因为感觉，虽然修饰的量什么都是一样的，但总会有差别，我如何确保不同组实验之间数据具有可比性，因为以前做过葡萄糖过氧化氢这类的传感，这些可以直接加到缓冲液中，可以直接看到变化，但DNA杂交时间长，而且不是立即就能直观看到结果，所以我怎么确定之后的位置都在一起？
除非你做的是那种可重复利用的，比方说通过竞争等反应可以多次利用修饰后的电极，否则一般都是磨了重新修饰的。CV可以考虑峰位置在一起，DPV不太可能每次峰电位完全一样，多少有点差别，取峰值就行。你如果检测的是不同浓度的DNA，可以考虑先做低浓度的，然后同一个电极不打磨继续做高浓度的，一系列浓度做完了磨掉然后修饰再做一组。
3.还有就是各位前辈在做这个的时候有什么小技巧，或需要注意的点也可以说。
没啥技巧

，多做几个样，舍掉比较不靠谱的样，其他取平均值。这个肯定没有那种直接将MB加入溶液作媒介体的好做，电流变化小多了。