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olea

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cys452008(langzhizhou代发): 金币+20 2016-07-26 00:28:10
1.修饰完成后,如果采用DPV检测的话,需要有什么步骤吗?因为我之前自己尝试的,每次DPV扫的都不一样,前一次和后一次都在变化线都不能重合,在测DPV前需要通氮除氧,或者扫个CV稳定一下吗?
用缓冲溶液浸泡几分钟,洗掉不牢的部分。DPV比较灵敏,不像CV那么稳定,不能重合没关系,重复测多次,根据基线取峰值然后取平均值。MB的反应应该跟氧没啥反应,不需要除氧,扫CV也不用。
2.当这组实验结束之后,电极需要洗净打磨,然后重新修饰还是有什么其他办法直接保留基地去除上面的东西?如果需要,我有一个问题,我怎么保证每次实验所得到的峰位置在一起,因为感觉,虽然修饰的量什么都是一样的,但总会有差别,我如何确保不同组实验之间数据具有可比性,因为以前做过葡萄糖过氧化氢这类的传感,这些可以直接加到缓冲液中,可以直接看到变化,但DNA杂交时间长,而且不是立即就能直观看到结果,所以我怎么确定之后的位置都在一起?
除非你做的是那种可重复利用的,比方说通过竞争等反应可以多次利用修饰后的电极,否则一般都是磨了重新修饰的。CV可以考虑峰位置在一起,DPV不太可能每次峰电位完全一样,多少有点差别,取峰值就行。你如果检测的是不同浓度的DNA,可以考虑先做低浓度的,然后同一个电极不打磨继续做高浓度的,一系列浓度做完了磨掉然后修饰再做一组。
3.还有就是各位前辈在做这个的时候有什么小技巧,或需要注意的点也可以说。
没啥技巧,多做几个样,舍掉比较不靠谱的样,其他取平均值。这个肯定没有那种直接将MB加入溶液作媒介体的好做,电流变化小多了。
11楼2016-05-04 09:43:42
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张盼盼……

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
cys452008(langzhizhou代发): 金币+2 2016-07-26 00:28:40
1.只要你一次测得的结果OK就可以了,每次的规律相同。峰电流确实每次都会有变化。我测得DPV也是这样的。
2.电极每次用之前打磨干净就可以了。没有做过葡萄糖氧化酶,不太清楚情况。
12楼2016-07-21 12:14:56
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乐小sana

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

DPV的灵敏度比较高,一般不同电极还是会有所差别的,打磨的干净与否,每次出来的曲线基线可能都会不一样,

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13楼2016-07-25 08:18:12
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勤奋的smile

铁杆木虫 (著名写手)

我也是小白,完全不懂,顶一下

发自小木虫Android客户端
14楼2016-08-05 00:23:41
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