24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4766)
>导师招生 (202)
>虫友互识 (201)
>文献求助 (195)
>基金申请 (184)
>硕博家园 (116)
>考博 (116)
>博后之家 (91)
>休闲灌水 (53)
>找工作 (51)
>招聘信息布告栏 (42)
>论文投稿 (42)
>论文道贺祈福 (37)
>教师之家 (34)
>考研 (34)
>公派出国 (32)

返回列表

sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 18.8
帖子: 82
在线: 83.3小时
虫号: 3096694
注册: 2014-03-28
性别: GG
专业: 微生物资源与分类学

[求助] 请问抑菌试验中加的是菌液，还是融合蛋白，还是目的蛋白呢？

我在表达一个免疫相关的基因
现在在将表达产物进行抑菌实验
用的pET32a载体，序列比较大

请问实验的时候是加的菌液，还是融合蛋白，还是切割后的目的蛋白呢？

最近做的时候一直没有看到抑菌圈，对照用的氨苄青霉素倒是很大···

因为一直用的是融合蛋白做的，细胞直接破碎后的上清和沉淀都做过（SDS-PAGE显示都有目的蛋白条带）
但是根本一点抑菌圈都没有

是还需要进一步切掉融合蛋白的前段序列吗？我看了下前面真的占了不小的部分，总共25k左右的融合蛋白，前端非目的蛋白占了能有20k吧
需要切除之后再进行吗？感谢解答！

回复此楼