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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 请问抑菌试验中加的是菌液，还是融合蛋白，还是目的蛋白呢？
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[求助] 请问抑菌试验中加的是菌液，还是融合蛋白，还是目的蛋白呢？

我在表达一个免疫相关的基因
现在在将表达产物进行抑菌实验
用的pET32a载体，序列比较大

请问实验的时候是加的菌液，还是融合蛋白，还是切割后的目的蛋白呢？

最近做的时候一直没有看到抑菌圈，对照用的氨苄青霉素倒是很大···

因为一直用的是融合蛋白做的，细胞直接破碎后的上清和沉淀都做过（SDS-PAGE显示都有目的蛋白条带）
但是根本一点抑菌圈都没有

是还需要进一步切掉融合蛋白的前段序列吗？我看了下前面真的占了不小的部分，总共25k左右的融合蛋白，前端非目的蛋白占了能有20k吧
需要切除之后再进行吗？感谢解答！
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1楼 2016-04-15 11:10:54
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781055707

木虫 (著名写手)
楼主PET32A的质粒可否送些给我，邮费我来付。。。。。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2016-05-17 16:46:33
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