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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[求助] 请问抑菌试验中加的是菌液,还是融合蛋白,还是目的蛋白呢?

我在表达一个免疫相关的基因
现在在将表达产物进行抑菌实验
用的pET32a载体,序列比较大

请问实验的时候是加的菌液,还是融合蛋白,还是切割后的目的蛋白呢?

最近做的时候一直没有看到抑菌圈,对照用的氨苄青霉素倒是很大···

因为一直用的是融合蛋白做的,细胞直接破碎后的上清和沉淀都做过(SDS-PAGE显示都有目的蛋白条带)
但是根本一点抑菌圈都没有

是还需要进一步切掉融合蛋白的前段序列吗?我看了下前面真的占了不小的部分,总共25k左右的融合蛋白,前端非目的蛋白占了能有20k吧
需要切除之后再进行吗?感谢解答!
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781055707

木虫 (著名写手)

楼主PET32A的质粒可否送些给我,邮费我来付。。。。。
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2016-05-17 16:46:33
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