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sdjnyxn123银虫 (小有名气)
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[求助]
请问抑菌试验中加的是菌液，还是融合蛋白，还是目的蛋白呢？
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我在表达一个免疫相关的基因 现在在将表达产物进行抑菌实验 用的pET32a载体，序列比较大 请问实验的时候是加的菌液，还是融合蛋白，还是切割后的目的蛋白呢？ 最近做的时候一直没有看到抑菌圈，对照用的氨苄青霉素倒是很大··· 因为一直用的是融合蛋白做的，细胞直接破碎后的上清和沉淀都做过（SDS-PAGE显示都有目的蛋白条带） 但是根本一点抑菌圈都没有 是还需要进一步切掉融合蛋白的前段序列吗？我看了下前面真的占了不小的部分，总共25k左右的融合蛋白，前端非目的蛋白占了能有20k吧 需要切除之后再进行吗？感谢解答！ |
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