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李保磊金虫 (著名写手)
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问下如何从一宿主细胞通过PCR的方法扩增未知序列的基因(已知功能)？需要具体的步骤，越详细越好，拜托了 （最好从突变株出发，其它方法也行） @wizardfan @biostar2009 @飞约疯人院 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2016-04-14 13:15:32
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一共想到2方法，一个就是和你的差不多，我们觉得可能有点费时，而且得到的是不是序列一部分，所以……老师给我们的提示是突变株，什么质粒，PCr，大肠杆菌之类的，我们也不知道怎么做，所以向大神们请教下 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-04-14 19:56:36
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一共想到2方法，一个就是和你的差不多，我们觉得可能有点费时，而且得到的是不是序列一部分，所以……老师给我们的提示是突变株，什么质粒，PCr，大肠杆菌之类的，我们也不知道怎么做，所以向大神们请教下 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-04-14 19:57:00
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【答案】应助回帖
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抱歉，很久没登录了，如果是突变株的话就更好办了，直接找到原基因序列，设计特异性引物，然后以你的样品DNA为模板，进行pcr扩增就行了，得到的序列插入到大肠杆菌的T3载体，再扩增一下，提质粒测序就可以了。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-04-25 16:11:20
李保磊
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6楼2016-04-26 12:42:50
