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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

[求助] 提质粒双酶切怎么电泳这样？ 已有1人参与

大提质粒并进行双酶切，以前做一直没什么问题，这次怎么变成这样？是跟我换成了百分之二的琼脂糖胶有关吗？以前都是百分之一的，为什么换了胶就变这样了？

提质粒双酶切怎么电泳这样？


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1楼 2016-04-13 18:24:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个胶的问题在哪里呢？marker跑的挺好的呀，不知道你说的是什么问题

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
2楼2016-04-13 19:40:55
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普通回帖

梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)
酶切多长时间？条带大小能和maker对上吗？

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3楼2016-04-13 20:38:55
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)
提质粒时加rna酶了吗

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4楼2016-04-13 20:41:51
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-13 19:40:55
这个胶的问题在哪里呢？marker跑的挺好的呀，不知道你说的是什么问题

我的问题是为什么下面有一条很亮的带，质粒应该是两千多bp的啊？

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5楼2016-04-14 11:07:27
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-13 20:38:55
酶切多长时间？条带大小能和maker对上吗？

酶切四个小时，条带大小是对的，就是不知道为什么下面有一条亮带

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6楼2016-04-14 11:08:17
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-13 20:41:51
提质粒时加rna酶了吗

加过酶了呢

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7楼2016-04-14 11:09:15
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
铿锵爪神: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2016-04-14 13:21:21
引用回帖:
5楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2016-04-14 11:07:27
我的问题是为什么下面有一条很亮的带，质粒应该是两千多bp的啊？
...

哦，那就是RNA吧，大提质粒浓度高，操作相对粗放，相对RNA量也多，这样RNase不足够来降解

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
8楼2016-04-14 12:03:45
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-14 12:03:45
哦，那就是RNA吧，大提质粒浓度高，操作相对粗放，相对RNA量也多，这样RNase不足够来降解
...

那我还有个问题，第一泳道我跑的是环状质粒，为什么出来的条带是线性质粒的条带呢？环状质粒应该比线性质粒跑得快些啊

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9楼2016-04-14 13:23:48
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
求助求助啊

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10楼2016-04-14 17:25:41
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