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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » MTT实验结果分析求助
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] MTT实验结果分析求助 已有1人参与

敲除某基因，利用MTT看是否对细胞增殖产生影响？请问结果怎么分析啊？用什么软件分析？（96孔板，四外围pbs封闭，一排零对照，其余是实验组和对照组）
PS：看文献，很多都是只有实验和对照的两条生长曲线，好像并没有体现出两组别的显著差异啊（就是P值小于0.05或0.01的）。请好人给我详细讲讲。不胜感激
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1楼 2016-04-12 00:40:22
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-13 09:49:43
如果你有做平行的话，分光光度计测完以后，用spss分析即可
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2楼2016-04-12 09:34:18
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hlxxym at 2016-04-12 09:34:18
如果你有做平行的话，分光光度计测完以后，用spss分析即可

能给详细讲讲不？怎么做实验组和对照组的两条生长曲线，以及分析他们之间的统计学意义？
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3楼2016-04-12 13:07:55
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-04-13 09:49:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by 玄玄子 at 2016-04-12 13:07:55
能给详细讲讲不？怎么做实验组和对照组的两条生长曲线，以及分析他们之间的统计学意义？...

1、用分光光度计或者酶标仪分别测定不同时间点实验组和对照组的OD值，实验组和对照组都要设平行（n大于等于3）
2、在每个时间点，用平均值表示生长情况，用spss进行单因素方差分析以比较其是否存在显著性差异
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4楼2016-04-12 13:58:43
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hlxxym at 2016-04-12 13:58:43
1、用分光光度计或者酶标仪分别测定不同时间点实验组和对照组的OD值，实验组和对照组都要设平行（n大于等于3）
2、在每个时间点，用平均值表示生长情况，用spss进行单因素方差分析以比较其是否存在显著性差异...

1.我一块96孔板（一个时间点），实验组和对照组都是5条，其中每条都是5个孔，每条的最下面是零对照孔，我计算平均值是不是先把每条的上面的5个孔的数值分别减去这个零对照的数值后平均，然后这5条的平均值再平均？我的Y轴直接用od值表示吗？2.若在第一个时间点，实验组和对照组之间有显著差异，下一个时间点又没有显著差异，再下一个时间点又有差异（假如为同一趋势），那么作图的时候第二个数据能要吗？另外组内（实验组或对照组）不同时间点要进行显著差异比较吗？求助！
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5楼2016-04-12 14:22:30
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-13 09:50:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玄玄子 at 2016-04-12 14:22:30
1.我一块96孔板（一个时间点），实验组和对照组都是5条，其中每条都是5个孔，每条的最下面是零对照孔，我计算平均值是不是先把每条的上面的5个孔的数值分别减去这个零对照的数值后平均，然后这5条的平均值再平均？ ...

1、对，要先扣去背景。
    可以用OD值表示
2、我建议你干脆做柱状图吧。另外，第二个数据指的是什么？这里我有点没理解。
    要不要比较是由你说了算的，看你觉得是否能说明问题。
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6楼2016-04-12 15:41:42
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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hlxxym at 2016-04-12 15:41:42
1、对，要先扣去背景。
    可以用OD值表示
2、我建议你干脆做柱状图吧。另外，第二个数据指的是什么？这里我有点没理解。
    要不要比较是由你说了算的，看你觉得是否能说明问题。...

我指的第二个数据是第二个时间点的结果，实验组和对照组没有显著差异，想问这个数据是不是不能要？实验组和对照组的两条线假如一条在上，另一条都是在下，只是其中某时间点其实他们之间差异不显著。如果是这种两条曲线一条在上，另一条总是在下的是不是可以不用分析两组的差异，就可以得出促进或者抑制的结论呢？
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7楼2016-04-12 19:10:20
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柳梢月

金虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by hlxxym at 2016-04-12 13:58:43
1、用分光光度计或者酶标仪分别测定不同时间点实验组和对照组的OD值，实验组和对照组都要设平行（n大于等于3）
2、在每个时间点，用平均值表示生长情况，用spss进行单因素方差分析以比较其是否存在显著性差异...

我最近也打算做个MTT，我想通过MTT筛选药物浓度，并通过不同时间点测空白组和药物组的OD值，来确定正式实验中在哪个时间点收集细胞测其指标，不知道这种做法是否可行?忘高手指点。

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8楼2016-04-12 23:13:01
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
玄玄子: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢了 2016-04-13 14:28:14
引用回帖:
7楼: Originally posted by 玄玄子 at 2016-04-12 19:10:20
我指的第二个数据是第二个时间点的结果，实验组和对照组没有显著差异，想问这个数据是不是不能要？实验组和对照组的两条线假如一条在上，另一条都是在下，只是其中某时间点其实他们之间差异不显著。如果是这种两条 ...

你可以先重复一次实验，如果趋势还是这样，说明这是真实的趋势，没必要去掉这个点

如果重复后没有再出现这个情况，那就可能是人为误差，比如细胞初始密度之类的原因造成的

一般来说，投稿用的数据都要做差异显著性分析的
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9楼2016-04-13 10:56:02
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 柳梢月 at 2016-04-12 23:13:01
我最近也打算做个MTT，我想通过MTT筛选药物浓度，并通过不同时间点测空白组和药物组的OD值，来确定正式实验中在哪个时间点收集细胞测其指标，不知道这种做法是否可行?忘高手指点。
...

意思是寻找药物对细胞杀伤最强的时间点？或者寻找药物尚未对细胞产生毒性的时间点？     我觉得这两者都是可以的
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10楼2016-04-13 10:57:23
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