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分步酶切的问题
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质粒上的两个酶切位点紧挨，因此采用分步酶切，中间采用试剂盒纯化回收，但转化时发现自连现象严重。 怀疑试剂盒回收方法会回收一些电泳验证时看不到的小片段，于是改用切胶回收。 但将切胶后回收的片段电泳后，发现切胶时的一条亮带在回收后电泳变成了一亮一暗两个条带。 请教：是什么原因？该怎么改进？ 希望尽可能用试剂盒回收啊，效率比较高，可是又担心会回收到杂质和其他小片段 |
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