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请叫我实验汪

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何检测相关基因是否表达 已有1人参与

将水稻某个基因敲除了,怎么检测该基因信号通路上相关基因有没有表达啊?求助……

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wanghaiji

木虫 (著名写手)

科研家

Youcouldfailonehundredtimes,butyoumustwinthelast.
2楼2016-04-11 12:02:06
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、课题在基因敲除后,提取总RNA,反转录为cDNA,然后用针对该通路上相关基因的引物进行real time PCR (将野生型和敲除株进行对比)。
2、也可以在敲除后,进行转录组测序或者基因芯片分析
3、可以在敲除后提取总蛋白,然后用western检测上下游蛋白表达情况
3楼2016-04-11 12:37:18
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请叫我实验汪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wanghaiji at 2016-04-11 12:02:06
qPCR和WB验证。

灰常感谢

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4楼2016-04-11 14:43:16
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请叫我实验汪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hlxxym at 2016-04-11 12:37:18
1、课题在基因敲除后,提取总RNA,反转录为cDNA,然后用针对该通路上相关基因的引物进行real time PCR (将野生型和敲除株进行对比)。
2、也可以在敲除后,进行转录组测序或者基因芯片分析
3、可以在敲除后提取总 ...

灰常感谢

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5楼2016-04-11 14:43:26
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