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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 如何检测相关基因是否表达
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请叫我实验汪

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何检测相关基因是否表达 已有1人参与

将水稻某个基因敲除了，怎么检测该基因信号通路上相关基因有没有表达啊？求助……

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1楼 2016-04-11 10:58:15
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wanghaiji

木虫 (著名写手)

科研家
qPCR和WB验证。

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Youcouldfailonehundredtimes,butyoumustwinthelast.
2楼2016-04-11 12:02:06
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、课题在基因敲除后，提取总RNA，反转录为cDNA，然后用针对该通路上相关基因的引物进行real time PCR （将野生型和敲除株进行对比）。
2、也可以在敲除后，进行转录组测序或者基因芯片分析
3、可以在敲除后提取总蛋白，然后用western检测上下游蛋白表达情况
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3楼2016-04-11 12:37:18
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请叫我实验汪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanghaiji at 2016-04-11 12:02:06
qPCR和WB验证。

灰常感谢

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4楼2016-04-11 14:43:16
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请叫我实验汪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hlxxym at 2016-04-11 12:37:18
1、课题在基因敲除后，提取总RNA，反转录为cDNA，然后用针对该通路上相关基因的引物进行real time PCR （将野生型和敲除株进行对比）。
2、也可以在敲除后，进行转录组测序或者基因芯片分析
3、可以在敲除后提取总 ...

灰常感谢

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5楼2016-04-11 14:43:26
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