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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大神们，求助RNA提取260/230低的问题。
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一片丹心666

新虫 (初入文坛)

[求助] 大神们，求助RNA提取260/230低的问题。 已有6人参与

用艾德莱的试剂盒提取植物组织RNA，260/280正常，可就是260/230比值太低，几乎都小于1。跑胶条带也正常，28s比18s亮。之前提的一直正常，不知这两次是怎么回事。请教各位这样的RNA还能用吗？我后期要反转为cDNA做荧光定量，这样会不会影响ct值和标准曲线啊。急急急，求建议。

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1楼 2016-04-10 22:51:49
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-13 09:45:26
可能是样品中盐离子等物质过多，可以用乙醇沉淀后，70%乙醇洗涤一次，再重新溶解。
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3楼2016-04-11 00:03:01
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18726912610

木虫 (小有名气)
最后的RNA沉淀是什么颜色？也可能有些化学物质的残留

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2楼2016-04-10 23:27:52
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yy001519

银虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-13 09:45:43
230测的是盐浓度，做定量PCR的话要看你RNA的纯度和浓度，以及反转试剂盒的效率，一般浓度在500ng以上，纯度在1.7~2之间都没啥问题的。

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4楼2016-04-11 00:12:28
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-13 09:45:58
盐污染或者你试剂盒中提取液的残留，用70%乙醇多洗一遍。晾干再回溶。
一般穗后续影响不大。
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5楼2016-04-11 08:43:22
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查看全部 17 个回答
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