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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 植物miRNA qRT-PCR内参 已有1人参与

我最近要用 qRT-PCR来验证植物miRNA 的测序结果,但实验做下来发现U6内参好像不太适合(u6在WT中的ct值是20,而在突变体中是24),用5s做内参的话(5s在WT中的ct值是12,而在突变体中是13),感觉这两个内参都不太适合,大家有什么好的建议吗?
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

因为不知道你的实验背景,我就按我的理解来回答了,说错勿怪。

我猜测你是先对不同处理组的植物进行miRNA高通量测序,现在要用RT-PCR来验证测序结果。现在碰到的问题是没有合适的内参。那么,我建议你不妨从测序结果入手,挑选在各处理组中测序结果均表现出稳定表达的miRNA来作为内参。当然,稳妥起见,最好挑选3-5个,做RT-PCR后,用软件分析比较其稳定性。
2楼2016-04-11 13:04:57
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