应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问一下大家酵母pcr时加多少量
61/1返回列表
查看: 969  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

絮燕菲菲

新虫 (小有名气)

[求助] 请问一下大家酵母pcr时加多少量 已有1人参与

我用的是premix taq 酶，这个p时体系配制是多少？请求大家帮忙了，做了三次没做出来，都出来了引物二聚体。。。

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-04-07 00:11:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未老的黄

铁虫 (小有名气)
你这个问题提的，没说清楚啊…是菌落p还是染色体啊

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-04-07 00:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

絮燕菲菲

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 未老的黄 at 2016-04-07 00:35:15
你这个问题提的，没说清楚啊…是菌落p还是染色体啊

呀。。。是哦，是基因组pcr不好意思

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-07 09:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的基因组是试剂盒抽提的？还是机械破碎菌体后进行pcr的呢？引物的退火温度多少？是否有过优化摸索？你pcr反应体系是多大，模板又加了多少呢？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2016-04-07 18:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

絮燕菲菲

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-07 18:21:11
你的基因组是试剂盒抽提的？还是机械破碎菌体后进行pcr的呢？引物的退火温度多少？是否有过优化摸索？你pcr反应体系是多大，模板又加了多少呢？

额。。。。
试剂盒提的，我只想知道建立50微升的体系该加多少酵母基因组DNA，你问的其他问题目前正是急需解决的，
提出来测了od值，在25ng/ul左右。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-07 23:57:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张凡云

至尊木虫 (职业作家)
mix酶保真性不够高，你扩出来之后，还有下一步用途的话，建议你用高保真酶。然后是你说的pcr问题，我们一般用25微升体系，基本上都可以跑出来的，模版加1

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-04-10 09:01:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 絮燕菲菲 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +5 yufeiwaner 2026-08-09 5/250 2026-08-10 08:15 by BlakeReary
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭