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sunny0819

新虫 (小有名气)

[求助] MLST分析大神已有1人参与

已测序完,想要和MLST官网上序列进行比对确定ST分型,可是要怎么比对,百度了好多,都没有详细的步骤,进入MLST官网发现数据分析那块网页打不开呢,是在那里分析吗?还是我找错了,金币不多,做过的麻烦解答下吧!!!跪谢!!!

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binge920612

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-05-12 08:14:31
我也是刚刚学会,叙述不对的地方请谅解。
下面已单增李斯特菌为例:
1、将测序完的碱基序列复制到次网站窗口中http://bigsdb.web.pasteur.fr/perl/bigsdb/bigsdb.pl?db=pubmlst_listeria_seqdef_public&page=sequenceQuery,选择位点,然后提交。
2、将所有看家引物提交结果输入此网站中http://bigsdb.web.pasteur.fr/perl/bigsdb/bigsdb.pl?db=pubmlst_listeria_seqdef_public&page=sequenceQuery,提交得到MLST型。
3、在这里http://bigsdb.web.pasteur.fr/选择你要测定的菌。进入后点Sequences and profiles database 下的[Public] ,点Sequence query - query an allele sequence.进入上面的1,点Search profiles进入2,。
知道的就这些了。
2楼2016-04-21 17:34:12
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黑藻先生

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-05-12 08:15:38
你先找到你的菌的marker gene都有哪些(比如有的菌用的除了16s rRNA还有gdp什么的) 具体的你可以去MLST王章上找 应该有说一些reference marker

其次这些marker的基因长度是需要跟mlst网站里的一样的,比如有的基因他网站的reference长度是100,但是我们手头的这个基因由于一些原因(比如注释)可能是135或者别的 这种情况需要先Blast把手头基因处理成100

把他要求的marker按照同样长度输进去就出来了

#大概去年用过,也出过类似问题,是这么解决的#
3楼2016-05-02 17:00:34
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solomon7811

新虫 (小有名气)

不同的菌可能在不同的网站。有些网站以前接收MLST,现在可能不接收了,比如大肠杆菌有两个网站,其中一个改为接受NGS了。

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6楼2016-05-12 06:29:06
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sunny0819

新虫 (小有名气)

内容已删除
4楼2016-05-11 12:51:21
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sunny0819

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by binge920612 at 2016-04-21 17:34:12
我也是刚刚学会,叙述不对的地方请谅解。
下面已单增李斯特菌为例:
1、将测序完的碱基序列复制到次网站窗口中http://bigsdb.web.pasteur.fr/perl/bigsdb/bigsdb.pl?db=pubmlst_listeria_seqdef_public&page= ...

谢谢~

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5楼2016-05-11 12:51:37
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sunny0819

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by solomon7811 at 2016-05-12 06:29:06
不同的菌可能在不同的网站。有些网站以前接收MLST,现在可能不接收了,比如大肠杆菌有两个网站,其中一个改为接受NGS了。

嗯嗯,我找肺克的,MLST上也找不到

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7楼2016-05-12 18:33:00
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g0945111

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by binge920612 at 2016-04-21 17:34:12
我也是刚刚学会,叙述不对的地方请谅解。
下面已单增李斯特菌为例:
1、将测序完的碱基序列复制到次网站窗口中http://bigsdb.web.pasteur.fr/perl/bigsdb/bigsdb.pl?db=pubmlst_listeria_seqdef_public&p ...

还是不太懂,第一步懂了,每条序列上传上去,选择了位点提交。第二步是怎么弄,上传一个引物吗?上传了引物之后得到结果?
非常感谢
8楼2018-07-12 16:05:30
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g0945111

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by sunny0819 at 2016-05-12 18:33:00
嗯嗯,我找肺克的,MLST上也找不到
...

楼主搞明白了么 最近在做这个 想求助一下

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9楼2018-07-12 20:25:44
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g0945111

木虫 (小有名气)

求助 求助楼主 愿奉上膝盖和金币

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10楼2018-07-13 15:26:26
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