| 查看: 803 | 回复: 0 | ||
[求助]
western blot出现奇怪现象！！
|
 本人做western有大半年了，以前都好好的，最近出现奇怪现象：上周连续做了4次，样品均是同一批测浓度、制样，可是第1、3次gadph和目的条带（55KDa、130KDa）都好好的，第2、4次目的条带不错，但内参很不齐，有的泳道条带浓缩成一点，有的泳道甚至没有条带。这4次中，前两次孵育的是相同一抗，后两次也是新配的相同一抗，4次试验的二抗都相同。 本周我又做了两次，还是第一次正常，第二次gadph和55KDa的目的条带出现不齐、甚至空白的泳道。请问大神们这是什么原因啊？？ PS： 跑10% SDS-PAGE 60V 半小时，110V 2小时；PVDF膜转膜250mA 2.5h；5%脱脂牛奶封闭，一抗用5% BSA稀释（1：1000），二抗用TBST稀释（1：10000）.  gadph 3m56s.jpg  gadph 5m38s.jpg  目的条带 8s.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有274人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有67人回复
