| 查看: 860 | 回复: 0 | ||
[求助]
western blot出现奇怪现象！！
|
 本人做western有大半年了，以前都好好的，最近出现奇怪现象：上周连续做了4次，样品均是同一批测浓度、制样，可是第1、3次gadph和目的条带（55KDa、130KDa）都好好的，第2、4次目的条带不错，但内参很不齐，有的泳道条带浓缩成一点，有的泳道甚至没有条带。这4次中，前两次孵育的是相同一抗，后两次也是新配的相同一抗，4次试验的二抗都相同。 本周我又做了两次，还是第一次正常，第二次gadph和55KDa的目的条带出现不齐、甚至空白的泳道。请问大神们这是什么原因啊？？ PS： 跑10% SDS-PAGE 60V 半小时，110V 2小时；PVDF膜转膜250mA 2.5h；5%脱脂牛奶封闭，一抗用5% BSA稀释（1：1000），二抗用TBST稀释（1：10000）.  gadph 3m56s.jpg  gadph 5m38s.jpg  目的条带 8s.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有283人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
50