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HUALAWU

新虫 (小有名气)

[求助] 有关双酶切问题 已有1人参与

请问,双酶切质粒载体,由于没有合适的共同buffer,所以分开切的,但是第一个酶切完,没有进行回收纯化,而是在原有基础上继续加第二个酶和buffer进行酶切,这样的影响大吗?第一个酶的buffer会不会影响第二个酶的作用,有什么补救方法么?
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
猜测下,可能会有影响吧,最好还是第一个切好了回收下再切,个人意见。因为如果可以楼主这样切,那么应该可以有合适的buffer直接双酶切了吧,不过这也说不定。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-04-01 08:59:28
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HUALAWU

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2016-04-01 01:59:28
猜测下,可能会有影响吧,最好还是第一个切好了回收下再切,个人意见。因为如果可以楼主这样切,那么应该可以有合适的buffer直接双酶切了吧,不过这也说不定。

谢谢哈,加完第二酶切了大概40分钟,我还是不放心,还是用PCR纯化试剂盒纯化了下重新切的,结果还不错。
努力成就更好的自己
3楼2016-04-04 20:27:12
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