应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 想让大肠杆菌表达它原来没有的蛋白，是不是必需先构建克隆载体再构建表达载体？
182/2返回列表上一页12
查看: 2078  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

prthefu

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+5 2016-04-12 15:39:08
你要用你的新基因表达蛋白，那就需要先把这段基因的全长扩出来，然后再连入表达载体中，一般原核表达载体就是用大肠杆菌来做的，然后，连接转化进去后，进行检测，转化成功的，说明你的那段基因连到质粒上了，然后，你就可以做表达。但是，基因表达蛋白，是需要诱导的，你就需要紧接着做后面的诱导表达，检测蛋白，跑胶，然后，得到了蛋白，你就可以做后面的针对这个蛋白的一些实验了。
赞一下 回复此楼
nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
11楼2016-04-01 22:40:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MT233

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 圆加leaf at 2016-04-01 11:19:25
用pET然后转到JM109感受态细胞，效果怎么样？测序你一般是再把质粒提出来拿去测还是提什么去测比较准？不好意思，啰嗦问多一句~...

直接转表达菌，直接送保存的表达菌去测序！多收5块钱而已！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
12楼2016-04-02 00:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scofield111

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+2 2016-04-12 15:39:27
引用回帖:
6楼: Originally posted by I-Believe at 2016-03-31 15:01:46
pET可以，但是大肠杆菌表达后一般目的蛋白都是以包涵体状态聚集，没有正确折叠，就没有活性。
...

也不能一下打死，摇瓶难，发酵罐可能有点活性

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
13楼2016-04-02 00:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

I-Believe

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by scofield111 at 2016-04-02 00:24:39
也不能一下打死，摇瓶难，发酵罐可能有点活性
...

是，有些系列的载体和配套菌株是促进表达可溶蛋白的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
14楼2016-04-02 11:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oceansr

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
跟我做的一样啊。成功了没有

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-04-03 00:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
将目的基因与表达载体连接，导入大肠杆菌，诱导表达，但不一定每个基因都能成功表达！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-04-03 17:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oceansr

新虫 (初入文坛)
怎么没人回啊

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
17楼2016-04-17 23:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圆加leaf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by oceansr at 2016-04-17 23:16:01
怎么没人回啊

还没开始做，等做再分享经验哦
赞一下 回复此楼
18楼2016-05-05 11:03:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 圆加leaf 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +8 材料专硕调剂； 2026-02-28 9/450 2026-03-01 12:46 by 闭眼看蓝天
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 高分子化学与物理调剂 +5 好好好1233 2026-02-28 9/450 2026-03-01 10:59 by fengyu211
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭