| 查看: 1763 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于PLGA微球制备的问题 已有3人参与
|
||
|
本人第一次做微球，有好多问题想求助于各位大神，各位见笑了。 用复乳溶剂挥发法制备载蛋白的PLGA微球，外水相用PVA, 用紫外法测定蛋白的含量。做蛋白标曲的时候，是不是要用相应浓度的PVA溶液做空白啊， 我是这样做标曲的，大家看这样对吗？ 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 蛋白 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 ml 5%PVA 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 ML 水 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 ml 按照文献的步骤做到挥发完二氯甲烷后，离心，然后取上清液，测游离蛋白的吸光度，根据标曲计算游离药物的含量， 包封率=（总的投药量-游离药物量）/总投药量*100% 这时，用紫外测游离蛋白的吸光度时，是不是也应以相应浓度的PVA溶液做空白对照呢？紫外特别不稳呀，有时计算包封率都成了负值…… 现在脑子感觉转不过弯了，希望各位给以指正指导。谢谢啦 |
回复此楼» 猜你喜欢
321求调剂
已经有5人回复
-
一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂
已经有7人回复
-
一志愿天大材料与化工（085600）总分338
已经有5人回复
-
288求调剂
已经有3人回复
-
材料080500调剂求收留
已经有4人回复
-
一志愿吉林大学材料学硕321求调剂
已经有9人回复
-
294求调剂材料与化工专硕
已经有8人回复
-
一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂
已经有10人回复
-
一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂
已经有3人回复
-
332求调剂
已经有3人回复
5楼2022-04-18 09:43:14
wpk9904
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1178.3
- 散金: 154
- 红花: 2
- 帖子: 224
- 在线: 65.4小时
- 虫号: 3024481
- 注册: 2014-03-06
- 专业: 药剂学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
丁勤奋: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-30 14:51:21
感谢参与，应助指数 +1
丁勤奋: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-30 14:51:21
|
首先，你制作标曲时，你要确定你标曲的精密度，明白吗？后面的结果很容易出现负值的原因是：前面的标曲适用方位太大了，例如适合蛋白的浓度为1-100 mg/ml，但你后面测游离时由于被稀释了很多倍，导致游离药物的浓度可能只有0.1，此时你把它带入标曲就很容易出现问题，这是不可以的。 对于要不要加PVA溶液做空白，我的建议是前后保持一致吧，如果加整个实验都加，如果不加，整个实验就都别加。如果没有明显的吸光度，和水一样，就不用加了 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2016-03-30 08:12:24
送红花一朵 |
你好，谢谢回复，我还是有些疑问。 我做标曲时，蛋白的浓度从小到大是 0.0077、0.0154、0.0231、0.0308、0.0385、0.0462、0.0539、0.0616、0.0693 标准曲线回归方程是y=7.0519x+0.04472 然后制备微球，考察单因素，比如，用3%PVA做外水相时，就取1ml 3%PVA做空白对照，加考马斯亮蓝5ml，然后取上清液，测定吸光度。有时测出的吸光度为0.034，根本就没法带入方程呀。而且吸光度在0.2-0.8才稳定。而我测得的吸光度都是0.0几的。超过0.2的计算出来的游离药量就超过总的投药量了。  不好意思，表述的可能不清楚，希望能帮我指正哪些步骤做错了。谢谢了 |
3楼2016-03-31 16:13:00
wpk9904
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1178.3
- 散金: 154
- 红花: 2
- 帖子: 224
- 在线: 65.4小时
- 虫号: 3024481
- 注册: 2014-03-06
- 专业: 药剂学
4楼2016-03-31 23:16:11
