应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » XbaI单酶切pUC18质粒的问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 440  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

胡笳桃子

新虫 (小有名气)

[交流] XbaI单酶切pUC18质粒的问题

    将购买的pUC18质粒转化到大肠杆菌后抽提质粒，用XbaI做单酶切试验，但总是酶切不完全（得到两条挨得很近的条带）。而选用购买得到的纯pUC质粒酶切，却可以完全酶切。
    尝试降低模板量，结果依然一样；而采用BamHI却可以完全酶切，没有任何问题。
    是因为甲基化的影响吗？还是质粒本身纯度的关系？
    因为打算分步酶切，所以希望第一步酶切尽可能完全，这样可以通过乙醇沉淀进行回收，而不是需要两次切胶回收，那样回收率太低了，需要的质粒量很大，也比较费时。
    请教各位，该怎么解决这个问题呢？？？
    谢谢啊！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
赠人玫瑰，手有余香。
1楼 2008-10-21 09:36:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
把购买的载体转化了 再用 不知道可行不可行
我认为肯定有问题 否则公司还怎么买载体挣钱呢
赞一下 回复此楼
5楼2008-10-22 11:46:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

zhongdianshi

银虫 (小有名气)
我认为是你自己提取的质粒纯度不好。如果，用量比较大的话，可以尝试大量提取，然后，再酶切试试。
引用回帖:
Originally posted by 胡笳桃子 at 2008-10-21 09:36:
    将购买的pUC18质粒转化到大肠杆菌后抽提质粒，用XbaI做单酶切试验，但总是酶切不完全（得到两条挨得很近的条带）。而选用购买得到的纯pUC质粒酶切，却可以完全酶切。
    尝试降低模板量，结果依然一 ...

赞一下 回复此楼
2楼2008-10-22 07:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boouy

银虫 (正式写手)
应该是甲基化的问题，可以选择别的菌株。
赞一下 回复此楼
3楼2008-10-22 09:46:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡笳桃子

新虫 (小有名气)
嗯好的，谢谢楼上。
回复此楼
赠人玫瑰，手有余香。
4楼2008-10-22 10:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料求调剂 +7 @taotao 2026-03-21 7/350 2026-03-27 10:26 by edmund7
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +8 y7czhao 2026-03-26 8/400 2026-03-26 19:51 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +7 丹青奶盖 2026-03-26 7/350 2026-03-26 19:18 by macy2011
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +4 YYYYYNNNNN 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:00 by macy2011
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭