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bugliuyun

铁虫 (小有名气)

[求助] 一夜没怎么睡,大肠杆菌自溶,让我好累! 已有12人参与

做了两三个月工程菌发酵了,总是自溶!试了好多办法,终不能解决!突然感觉自己是不是真的没有能力?心好累!

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jiweiweiw

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我给你说的重点在20楼,你反而纠结究竟是“毒死了”还是“饿死了”,如何设计实验.......
我是搞生产的,用小罐积累了经验后直接上的大罐,勤更换1、2级粗过滤器滤芯,对大肠杆菌这种优势菌来说就没有多大风险了,只要保证你的菌种活力旺盛、没有被污染,发酵前期你的大肠菌能够正常扩增的话,中后期肯定不会染菌了(更何况还有抗生素)。至于你这种“自溶”情况,除了我之前说的“空气质量”是一个可能外,就是你的发酵后期营养不足,“老菌”只能通过分解自身来给“新菌”提供营养物质,你取个样离心测下发酵液含糖量吧。另外补知道你是搞生产的还是搞实验研究的,你的发酵除了问题先将所有可能原因一一列举出来,迅速从易到难的下手解决,一一排除,不要以研究思想搞生产,耽误事,可能等你真把最艰难的原因排除掉的时候,到头来其实只是一个过滤器没有密封好的原因。
29楼2016-03-31 15:52:57
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-字仲康

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

7楼2016-03-28 20:26:26
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jiweiweiw

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇见过两次菌体自溶,原因都是空气质量不过关,一是空气滤芯使用时间过长,没有进行及时更换,二是空气中油水过多,因为冷干机效果不好还有没有给过滤器及时排水。另外你也得考虑一下你的营养是不是不够充分,氨水调节是否不及时,补料系统是否完善,搅拌转速、风量(溶氧)能否跟得上菌体生长?说一下你们以前正常发酵的参数,最终菌体收率(湿重g/L),我把我们用的一些控制关键点也跟你交流下,看看对你有没有帮助,能说的说。
20楼2016-03-29 22:53:26
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bugliuyun

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
28楼: Originally posted by 小花木兰 at 2016-03-31 10:04:48
自溶问题我们也很常见,一直没有得到解决,菌种退化会不会导致自溶呢,如何确认菌种退化呢

做了很多工作,基本解决,

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34楼2016-04-14 11:18:24
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monoshen

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

发酵培养到中期无故自溶,是不是营养不足造成的,乙酸积累过量会不会自溶啦,谢谢
彼岸
53楼2019-10-29 23:23:39
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普通回帖

YX要努力

新虫 (著名写手)

奇迹总会出现,别什么都说自己没能力

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2楼2016-03-28 07:49:50
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CC-Brandy

金虫 (小有名气)

加油!
学到老活到老
3楼2016-03-28 08:23:41
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lindench

专家顾问 (文坛精英)

这个过程我也经历过,深有体会,不要轻易怀疑自己,静下心来,先查出原因。

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4楼2016-03-28 08:58:04
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bugliuyun

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lindench at 2016-03-28 08:58:04
这个过程我也经历过,深有体会,不要轻易怀疑自己,静下心来,先查出原因。

嗯嗯,其实,已经找了好久了,也排除了若干个。在企业,工作总是因为各种原因受到限制。不如学校。

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5楼2016-03-28 20:17:47
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bugliuyun

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by YX要努力 at 2016-03-28 07:49:50
奇迹总会出现,别什么都说自己没能力

给自己的目标是4个月左右成熟一个工艺。但是,各种不顺呢!倍受打击!

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6楼2016-03-28 20:19:32
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
往噬菌体污染方面考虑下,问题可能在这。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
8楼2016-03-28 23:20:34
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sxjcas

禁虫 (知名作家)

本帖内容被屏蔽

9楼2016-03-29 10:10:20
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bugliuyun

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by -字仲康 at 2016-03-28 20:26:26
经常染菌的,就应该停下来先不进行发酵了吧,清洁环境卫生,用氢氧化钠消毒罐,更换过滤器滤芯

这些都做过的哦

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10楼2016-03-29 12:44:53
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