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bugliuyun

铁虫 (小有名气)

[求助] 一夜没怎么睡,大肠杆菌自溶,让我好累! 已有12人参与

做了两三个月工程菌发酵了,总是自溶!试了好多办法,终不能解决!突然感觉自己是不是真的没有能力?心好累!

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jiweiweiw

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇见过两次菌体自溶,原因都是空气质量不过关,一是空气滤芯使用时间过长,没有进行及时更换,二是空气中油水过多,因为冷干机效果不好还有没有给过滤器及时排水。另外你也得考虑一下你的营养是不是不够充分,氨水调节是否不及时,补料系统是否完善,搅拌转速、风量(溶氧)能否跟得上菌体生长?说一下你们以前正常发酵的参数,最终菌体收率(湿重g/L),我把我们用的一些控制关键点也跟你交流下,看看对你有没有帮助,能说的说。
20楼2016-03-29 22:53:26
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jiweiweiw

银虫 (小有名气)

简单的说,你得检查一下你的菌是被“饿”死的还是被“毒”死的还是被“吃”了。
21楼2016-03-29 23:20:09
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jiweiweiw

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我给你说的重点在20楼,你反而纠结究竟是“毒死了”还是“饿死了”,如何设计实验.......
我是搞生产的,用小罐积累了经验后直接上的大罐,勤更换1、2级粗过滤器滤芯,对大肠杆菌这种优势菌来说就没有多大风险了,只要保证你的菌种活力旺盛、没有被污染,发酵前期你的大肠菌能够正常扩增的话,中后期肯定不会染菌了(更何况还有抗生素)。至于你这种“自溶”情况,除了我之前说的“空气质量”是一个可能外,就是你的发酵后期营养不足,“老菌”只能通过分解自身来给“新菌”提供营养物质,你取个样离心测下发酵液含糖量吧。另外补知道你是搞生产的还是搞实验研究的,你的发酵除了问题先将所有可能原因一一列举出来,迅速从易到难的下手解决,一一排除,不要以研究思想搞生产,耽误事,可能等你真把最艰难的原因排除掉的时候,到头来其实只是一个过滤器没有密封好的原因。
29楼2016-03-31 15:52:57
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