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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱柱选择
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上海波粒

铜虫 (正式写手)

[交流] 液相色谱柱选择 已有8人参与

液相色谱柱决定最终分离效果，所以在选择色谱柱时候有必要考虑清楚自己的需求。
首先液相色谱柱目前来说分为正反相色谱柱，正相有SI等，反相有C18等。正相主要分离极性物质，反相主要分离非极性物质，氨基柱等主要分离二者之间的。
明确了色谱柱大概功能之后，确认下自己样品信息，基本就有点眉目了，方向对了，剩下的事情就是细节了如：键合相、粒径、孔径、碳载量等
键合相：确定了正反相后基本就简单了，正相很简单，我们重点讨论下反相，C18主要分离非极性和弱极性物质，因为是键合硅胶，所以C18也分好几种有常规的如C18-A，耐纯水的OL Apple C18-AQ、耐酸碱的OL Apple C18-EX等，如果发现C18保留很弱，调整流动相也不行，这个时候可以考虑C8甚至C4等。
粒径：色谱法追求的是高效、高分辨、高速等。目前来说亚2um填料或者2UM核壳填料是很理想的模型，基本具备“三高”特征尤其是高速，线速度不在影响分离度，不过附带的缺点就是高压，要升级相应的硬件，成本高昂，需要谨慎考虑。
5um填料最普遍，目前来说完全可以胜任各种日常检测，即使有特殊要求，3um色谱填料基本上也能全覆盖，不过该模型下线速度和分离度是成反比的。
孔径：目前很多60~300A都有，甚至更高或者更低的。开孔的填料多了个类似分子筛功能，所以选择孔径一定要关注分子量，蛋白（分子量5000以上）一般都需要在160A以上，多肽（分子量上限在3000左右）在120A左右，一般快速柱孔径都很小，可以缩短样品路径。所以国际上还有无孔硅胶柱子，也很适合蛋白分离，彻底解决蛋白分子量大和太粘稠堵住孔径问题。
碳载量：快速柱碳载量很低，如A家等，省时间，省溶剂，但分析部分复杂样品如中药等有点力不从心，这个时候可以考虑英国OL Apple色谱柱，碳载量15~23%，碳载量数值就像河床的水草，越高代表越密集，保留样品能力越强，越有可能分离开难分离物质。
以上信息仅供参考，个人能力有限，欢迎大伙补充！
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1楼 2016-03-27 16:41:44
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爱雪飘飘

铁杆木虫 (著名写手)
★
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如果发现C18保留很弱，调整流动相也不行，这个时候可以考虑C8甚至C4等

你在瞎扯吧
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3楼2016-03-28 15:23:07
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tixiaoyy

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱雪飘飘 at 2016-03-28 15:23:07
如果发现C18保留很弱，调整流动相也不行，这个时候可以考虑C8甚至C4等

你在瞎扯吧

不懂就不要说话好吧

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毫无胜利可言，坚持意味一切
5楼2016-03-28 19:04:36
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上海波粒

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lingshu at 2016-04-05 15:40:44
什么意思  楼主能否详细说一下   我只知道一般情况下C8与C18wl具有类似保留性质  但是保留比C18要弱啊
...

反相主要是分离非极性物质，弱极性物质等，C8极性要强于C18，C18对弱极性物质保留能力不强，这个时候就可以考虑用C8，请注意，此时讨论的是弱极性，不是非极性，非极性物质C18保留能力比C8强
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9楼2016-04-05 16:51:28
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普通回帖

HAOXUE-1
2楼2016-03-27 18:49:36
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上海波粒

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱雪飘飘 at 2016-03-28 15:23:07
如果发现C18保留很弱，调整流动相也不行，这个时候可以考虑C8甚至C4等

你在瞎扯吧

C8报弱极性能力比C18强，你不会不知道吧？
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4楼2016-03-28 18:22:13
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kelly虫

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
能不能推荐相关书籍？
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6楼2016-04-05 13:15:30
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上海波粒

铜虫 (正式写手)
内容已删除
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7楼2016-04-05 15:24:32
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lingshu

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 上海波粒 at 2016-03-28 18:22:13
C8报弱极性能力比C18强，你不会不知道吧？...

什么意思  楼主能否详细说一下   我只知道一般情况下C8与C18wl具有类似保留性质  但是保留比C18要弱啊

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8楼2016-04-05 15:40:44
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lingshu

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 上海波粒 at 2016-04-05 16:51:28
反相主要是分离非极性物质，弱极性物质等，C8极性要强于C18，C18对弱极性物质保留能力不强，这个时候就可以考虑用C8，请注意，此时讨论的是弱极性，不是非极性，非极性物质C18保留能力比C8强...

好的  谢谢

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10楼2016-04-06 09:41:38
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