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pubblezhu

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩不出条带

扩一段3000多的片段
首先模版没问题,因为用这个模版扩其他的基因都扩出来了。
酶用的高保真的酶。
体系是
水 13微升
镁离子buffer 4微升
dNTP 1.6微升
F P 0.4微升
R P 0.4微升
模版 0.4微升
酶 0.2微升
程序是
98 2min
94 40s
50 40s
72 3min20s
72 7min
特别奇怪的一点是 ,我扩出来了一次,然后后来再也扩不出来。
而且电泳结果是任何条带都没有,连引物二聚体都没有。
这是怎么回事?

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pubblezhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 787719259 at 2016-03-28 08:28:57
我出现过你类似的情况,我扩的2000多的,换成长片段的酶后就扩出来了

我现在的问题
是十次里面两次扩的出来八次扩不出来

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11楼2016-03-28 09:15:25
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jifengyun321

新虫 (正式写手)

你可以将一次PCR的产物为模板再次扩增看看,有条带吗

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2楼2016-03-26 23:13:12
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pubblezhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jifengyun321 at 2016-03-26 23:13:12
你可以将一次PCR的产物为模板再次扩增看看,有条带吗

那次没回收……

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3楼2016-03-27 16:55:03
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jifengyun321

新虫 (正式写手)

4楼2016-03-27 18:30:02
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