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nicole9208

新虫 (初入文坛)

[求助] IPTG诱导蛋白表达以后,目的蛋白浓度反而下降

如题,我用0.5mMIPTG,37℃诱导4h,载体是pET28a,转到BL21里的,目的蛋白浓度反而比对照组下降。实在困惑,求大神解答!!
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任我逍遥江南

铜虫 (正式写手)

建议在诱导前测一下菌液OD ,找一个最适的OD

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-03-27 02:30:15
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匿名

用户注销 (正式写手)

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-03-24 16:38:10
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nicole9208

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 青蛙快飞 at 2016-03-24 16:38:10
诱导导致菌体正常代谢紊乱,繁殖受阻,菌数量较比不诱导菌数量下降,菌单体表达量虽多,但总含量相比下降。建议再降IPTG浓度,纯推测,因为我没看到

谢谢~~但应该不是呢~因为我自己做的菌株诱导前后没有变化,就拿以前师兄做的菌株按照他成功的方法去做,以便确定是不是菌株的问题。但是拿师兄的菌株和方法就得到了这个结果呢??
3楼2016-03-25 09:06:49
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nicole9208

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 任我逍遥江南 at 2016-03-27 02:30:15
建议在诱导前测一下菌液OD ,找一个最适的OD

就是要求OD600=0.6呢,谢谢啦~
5楼2016-03-29 17:25:29
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