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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » IPTG诱导蛋白表达以后，目的蛋白浓度反而下降
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nicole9208

新虫 (初入文坛)

[求助] IPTG诱导蛋白表达以后，目的蛋白浓度反而下降

如题，我用0.5mMIPTG，37℃诱导4h，载体是pET28a，转到BL21里的，目的蛋白浓度反而比对照组下降。实在困惑，求大神解答！！
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1楼 2016-03-24 15:59:35
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nicole9208

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 青蛙快飞 at 2016-03-24 16:38:10
诱导导致菌体正常代谢紊乱，繁殖受阻，菌数量较比不诱导菌数量下降，菌单体表达量虽多，但总含量相比下降。建议再降IPTG浓度，纯推测，因为我没看到

谢谢~~但应该不是呢~因为我自己做的菌株诱导前后没有变化，就拿以前师兄做的菌株按照他成功的方法去做，以便确定是不是菌株的问题。但是拿师兄的菌株和方法就得到了这个结果呢？？
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3楼2016-03-25 09:06:49
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匿名

用户注销 (正式写手)
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nicole9208
2楼2016-03-24 16:38:10
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任我逍遥江南

铜虫 (正式写手)
建议在诱导前测一下菌液OD ,找一个最适的OD

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nicole9208
4楼2016-03-27 02:30:15
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nicole9208

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 任我逍遥江南 at 2016-03-27 02:30:15
建议在诱导前测一下菌液OD ,找一个最适的OD

就是要求OD600=0.6呢，谢谢啦~
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5楼2016-03-29 17:25:29
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