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zmb1213

铁虫 (初入文坛)

[交流] GSH测定方法及原理

GSH测定方法及原理

测定原理:1MGSH与1M DTNB (二硫代二硝基苯甲酸)反应生成黄色产物硫硝基苯甲酸此物质在412nm处有最高吸收峰。根据硫硝基苯甲酸的生成量来计算GSH的量。
谷胱甘肽:是谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组织成的三肽。其中,半胱氨酸含有一个巯基(-SH),含巯基化合物可以与DTNB反应,断裂DTNB的二硫键产生2-硝基-5-硫代苯甲酸(NTB-)
测定方法:0.05g种子加入1ml 5%的三氯乙酸研磨,10 000g离心10min。取上清液备用。

标曲:标准溶液0.1m M GSH标准溶液
0
0.01
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1m M
标准溶液用5%的三氯乙酸配制

取标准溶液50ul,分别加入520ul 150mM pH为7.8的PBS。混合均匀后,往各管中加入DTNB36ul。混合后,30℃保温反应5min。测定A412

样品测定同标曲测定方法。
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