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灰色彼得潘

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱主峰分叉已有5人参与

色谱柱:Thermo 的bds hypersil C-18柱(4.6*100,5um)
条件:缓冲液:甲醇=98:2—> 70:30  梯度洗脱
柱温25   流速1
今天做有关物质,进一针系统适用性后,样品主峰分叉了,后面重新配制流动相和系统,都出现主峰分叉情况,其他小的杂质峰峰型不错
色谱柱是新买的,之前做过一次同一物质的含量(条件:缓冲盐:甲醇=76:24  等度洗脱)
请问:
1.为什么会出现主峰分叉的情况?与前一次测含量有关系么?
2.柱子还能通过反冲或者再生重新恢复到能使用吗?
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灰色彼得潘

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zongyuan at 2016-03-22 09:53:33
我还能想到的一个问题就是:方法回到初始流动相所保持的时间是否足够

足够的,方法里有回到起始比例的,然后再平衡7分钟。我上面没写出来

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-03-22 11:49:47
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zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
灰色彼得潘: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-22 09:43:34
1.这个柱子能否确定适合这么低比例有机相,如果不知道可咨询品牌商工程师
2.新柱子经常出现,是否有活化,比如新柱子拿来后用甲醇小流速长时间冲洗过,有可能用一段时间好了
3.起始稀释剂是否有机试剂多,比初始流动相强度大
4.低高比例有机水冲洗柱子,最终高有机相保存,对柱子碳链有个恢复过程,可是很多人不在乎

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2016-03-21 23:04:48
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灰色彼得潘

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zongyuan at 2016-03-21 23:04:48
1.这个柱子能否确定适合这么低比例有机相,如果不知道可咨询品牌商工程师
2.新柱子经常出现,是否有活化,比如新柱子拿来后用甲醇小流速长时间冲洗过,有可能用一段时间好了
3.起始稀释剂是否有机试剂多,比初始流 ...

谢谢你的回复!
1.这柱子是ep推荐的,色谱系统一样。
2.新柱买回来后用0.2流速纯甲醇冲过夜了。
3.样品稀释是用流动相A,即缓冲盐溶液稀释的,没加有机相。
4.最近都用这根柱做实验,冲柱最后都用纯甲醇封柱的。

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-03-21 23:36:59
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zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)

新柱子会出现这种问题,有可能用过一段时间就正常了,我见过这类现象

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2016-03-21 23:50:40
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