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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱主峰分叉
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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灰色彼得潘

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱主峰分叉 已有5人参与

色谱柱：Thermo 的bds hypersil C-18柱（4.6*100,5um）
条件：缓冲液：甲醇=98:2—> 70:30  梯度洗脱
柱温25   流速1
今天做有关物质，进一针系统适用性后，样品主峰分叉了，后面重新配制流动相和系统，都出现主峰分叉情况，其他小的杂质峰峰型不错
色谱柱是新买的，之前做过一次同一物质的含量（条件：缓冲盐：甲醇=76:24  等度洗脱）
请问：
1.为什么会出现主峰分叉的情况？与前一次测含量有关系么？
2.柱子还能通过反冲或者再生重新恢复到能使用吗？
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1楼 2016-03-21 22:34:44
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灰色彼得潘

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zongyuan at 2016-03-21 23:04:48
1.这个柱子能否确定适合这么低比例有机相，如果不知道可咨询品牌商工程师
2.新柱子经常出现，是否有活化，比如新柱子拿来后用甲醇小流速长时间冲洗过，有可能用一段时间好了
3.起始稀释剂是否有机试剂多，比初始流 ...

谢谢你的回复！
1.这柱子是ep推荐的，色谱系统一样。
2.新柱买回来后用0.2流速纯甲醇冲过夜了。
3.样品稀释是用流动相A，即缓冲盐溶液稀释的，没加有机相。
4.最近都用这根柱做实验，冲柱最后都用纯甲醇封柱的。

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3楼2016-03-21 23:36:59
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zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
灰色彼得潘: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-22 09:43:34
1.这个柱子能否确定适合这么低比例有机相，如果不知道可咨询品牌商工程师
2.新柱子经常出现，是否有活化，比如新柱子拿来后用甲醇小流速长时间冲洗过，有可能用一段时间好了
3.起始稀释剂是否有机试剂多，比初始流动相强度大
4.低高比例有机水冲洗柱子，最终高有机相保存，对柱子碳链有个恢复过程，可是很多人不在乎

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2楼2016-03-21 23:04:48
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zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)
新柱子会出现这种问题，有可能用过一段时间就正常了，我见过这类现象

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4楼2016-03-21 23:50:40
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忍冬1018

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
改用乙腈冲洗下，是否有杂质强保留在色谱柱上了。
另外流动相的pH是多少，如果在6.5以上，可能是造成了柱硅胶溶解和流失，你只能反着用了。
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5楼2016-03-22 08:00:11
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