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共产主义

新虫 (小有名气)

[求助] 请问，这样的细胞是被污染了吗 已有7人参与

最近在养肝癌Huh-7细胞，可是一直养不好，传完代后总是会有细胞团块出现，而且总是长着长着就会有漂浮的死细胞出现，疑似真菌感染，操作的时候已经极小心了，可是已经连续三四瓶细胞出现这样的情况了，求高手解答是否是真菌感染。细胞一直养不好，没办法经行实验，都快愁死了！

请问，这样的细胞是被污染了吗
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请问，这样的细胞是被污染了吗-1
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请问，这样的细胞是被污染了吗-7
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共产主义

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1楼 2016-03-21 20:40:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

holdbio

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也有过这种现象，不过会不会是细胞本身不干净，或者消化成团？真菌污染有时也会有这种现象，不过你的培养基颜色怎么样？有木有说变浑浊。
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努力做好每一件事情
5楼2016-03-22 11:19:16
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xf350093144

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看起来不算污染 ，我以前被污染过一次，整个孔里面都能看到一小点一小点的细菌。你这个不像，倒像是消化过头了，细胞死掉了，不幸的是，我也曾有一次消化过头，结果怎么养都长不起来了。
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31楼2016-03-24 09:15:49
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四夕流年

新虫 (初入文坛)
不像真菌污染  后面那些条条什么的要么是死细胞团要么就是血清或培养板不干净 但细胞支原体污染可能性极大  因为你的细胞状态太差
处理：换液、PBS洗    注意是否那些块块还是很多  如果会长多就说明可能污染
     培养基建议加大血清浓度  细胞消化传代建议离心处理  加大细胞接种密度   待细胞状态回复再减少细胞
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6楼2016-03-22 13:13:13
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sknature

新虫 (小有名气)
对细胞温柔点，长的不好而已，长条条是培养基里边没弄干净的东西，没事！

发自小木虫Android客户端
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33楼2016-03-24 09:26:00
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普通回帖

黎花梦香

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
真菌污染有杆状的，你看看会不会长大的，黑乎乎的团状东西，我养的细胞有时候也会出现，但很小，分瓶后也不影响细胞生长的。轻微的染菌是可以通过消化传代稀释的。
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2楼2016-03-21 21:00:09
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MarchZR

银虫 (小有名气)
貌似是真菌污染，看着图片黑团像，因为没有放大可能是霉菌不像是支原体污染
细胞污染FAQ：
http://www.detaibio.com/topics/cell-culture-faq.html
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3楼2016-03-22 10:48:29
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MarchZR

银虫 (小有名气)
不过那长长的是什么，，应该不是细胞里面的东西吧。。。
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4楼2016-03-22 10:49:29
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共产主义

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by holdbio at 2016-03-22 11:19:16
我也有过这种现象，不过会不会是细胞本身不干净，或者消化成团？真菌污染有时也会有这种现象，不过你的培养基颜色怎么样？有木有说变浑浊。

培养基颜色基本上没什么变化，但每次传代后漂浮的死细胞比较多，会让培养基看起来浑浊，就是细胞的状态很差
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7楼2016-03-22 15:41:44
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共产主义

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by MarchZR at 2016-03-22 10:49:29
不过那长长的是什么，，应该不是细胞里面的东西吧。。。

很长的一条，刚复苏的细胞第一次传完代后显微镜观察突然发现了，后来换液之后就不见了，不是细胞里的，但细胞状态很差，长的也特别慢，今天已经第四天了还没有长满
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8楼2016-03-22 15:44:23
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共产主义

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 四夕流年 at 2016-03-22 13:13:13
不像真菌污染  后面那些条条什么的要么是死细胞团要么就是血清或培养板不干净 但细胞支原体污染可能性极大  因为你的细胞状态太差
处理：换液、PBS洗    注意是否那些块块还是很多  如果会长多就说明可能污染
    ...

换完液后团块没有长多，也没有变大，就是一直会有细胞慢慢的死掉，现在感觉可能是支原体污染，这段时间细胞的状态一直不好，估计是血清有问题。第一次传代后其实接种的密度不是很小，只是贴壁的细胞比较少，所以比较稀，而且长的特别慢，已经第四天了还没有长满。
像这种支原体污染的细胞还能要吗？有什么补救方法吗？
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9楼2016-03-22 15:52:01
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四夕流年

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 共产主义 at 2016-03-22 15:52:01
换完液后团块没有长多，也没有变大，就是一直会有细胞慢慢的死掉，现在感觉可能是支原体污染，这段时间细胞的状态一直不好，估计是血清有问题。第一次传代后其实接种的密度不是很小，只是贴壁的细胞比较少，所以比 ...

对实验来说  时间不多 那就还是赶紧复苏 再来什么的   毕竟耗时而且细胞状态对实验结果有些影响肯定是有的
处理的话  你可以加四环素（浓度比网上的小点  有用 只是效果不算很好   好在容易找）或者汉恒生物的抗支药物（个人经历真心还行，就是差不多类一个星期就别用类  对细胞毒性也大  听说有适用装  问问 靠自己了）
处理其实就是自己经验的积累  别太较真就好 就当死马当活马类 （我说的是条件允许的情况  一切以实验为重的前提啊  就这一皿细胞了的话  那你就得上老大心了  嘿嘿）
祝好
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10楼2016-03-23 09:26:35
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