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共产主义

新虫 (小有名气)

[求助] 请问,这样的细胞是被污染了吗已有7人参与

最近在养肝癌Huh-7细胞,可是一直养不好,传完代后总是会有细胞团块出现,而且总是长着长着就会有漂浮的死细胞出现,疑似真菌感染,操作的时候已经极小心了,可是已经连续三四瓶细胞出现这样的情况了,求高手解答是否是真菌感染。细胞一直养不好,没办法经行实验,都快愁死了!

请问,这样的细胞是被污染了吗
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holdbio

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也有过这种现象,不过会不会是细胞本身不干净,或者消化成团?真菌污染有时也会有这种现象,不过你的培养基颜色怎么样?有木有说变浑浊。
努力做好每一件事情
5楼2016-03-22 11:19:16
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xf350093144

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看起来不算污染 ,我以前被污染过一次,整个孔里面都能看到一小点一小点的细菌。你这个不像,倒像是消化过头了,细胞死掉了,不幸的是,我也曾有一次消化过头,结果怎么养都长不起来了。
31楼2016-03-24 09:15:49
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四夕流年

新虫 (初入文坛)

不像真菌污染  后面那些条条什么的要么是死细胞团要么就是血清或培养板不干净 但细胞支原体污染可能性极大  因为你的细胞状态太差
处理:换液、PBS洗    注意是否那些块块还是很多  如果会长多就说明可能污染
     培养基建议加大血清浓度  细胞消化传代建议离心处理  加大细胞接种密度   待细胞状态回复再减少细胞
6楼2016-03-22 13:13:13
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sknature

新虫 (小有名气)

对细胞温柔点,长的不好而已,长条条是培养基里边没弄干净的东西,没事!

发自小木虫Android客户端
33楼2016-03-24 09:26:00
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普通回帖

黎花梦香

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
真菌污染有杆状的,你看看会不会长大的,黑乎乎的团状东西,我养的细胞有时候也会出现,但很小,分瓶后也不影响细胞生长的。轻微的染菌是可以通过消化传代稀释的。
2楼2016-03-21 21:00:09
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MarchZR

银虫 (小有名气)

貌似是真菌污染,看着图片黑团像,因为没有放大可能是霉菌不像是支原体污染
细胞污染FAQ:
http://www.detaibio.com/topics/cell-culture-faq.html
3楼2016-03-22 10:48:29
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MarchZR

银虫 (小有名气)

不过那长长的是什么,,应该不是细胞里面的东西吧。。。
4楼2016-03-22 10:49:29
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共产主义

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by holdbio at 2016-03-22 11:19:16
我也有过这种现象,不过会不会是细胞本身不干净,或者消化成团?真菌污染有时也会有这种现象,不过你的培养基颜色怎么样?有木有说变浑浊。

培养基颜色基本上没什么变化,但每次传代后漂浮的死细胞比较多,会让培养基看起来浑浊,就是细胞的状态很差
7楼2016-03-22 15:41:44
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共产主义

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by MarchZR at 2016-03-22 10:49:29
不过那长长的是什么,,应该不是细胞里面的东西吧。。。

很长的一条,刚复苏的细胞第一次传完代后显微镜观察突然发现了,后来换液之后就不见了,不是细胞里的,但细胞状态很差,长的也特别慢,今天已经第四天了还没有长满
8楼2016-03-22 15:44:23
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共产主义

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 四夕流年 at 2016-03-22 13:13:13
不像真菌污染  后面那些条条什么的要么是死细胞团要么就是血清或培养板不干净 但细胞支原体污染可能性极大  因为你的细胞状态太差
处理:换液、PBS洗    注意是否那些块块还是很多  如果会长多就说明可能污染
    ...

换完液后团块没有长多,也没有变大,就是一直会有细胞慢慢的死掉,现在感觉可能是支原体污染,这段时间细胞的状态一直不好,估计是血清有问题。第一次传代后其实接种的密度不是很小,只是贴壁的细胞比较少,所以比较稀,而且长的特别慢,已经第四天了还没有长满。
像这种支原体污染的细胞还能要吗?有什么补救方法吗?
9楼2016-03-22 15:52:01
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四夕流年

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 共产主义 at 2016-03-22 15:52:01
换完液后团块没有长多,也没有变大,就是一直会有细胞慢慢的死掉,现在感觉可能是支原体污染,这段时间细胞的状态一直不好,估计是血清有问题。第一次传代后其实接种的密度不是很小,只是贴壁的细胞比较少,所以比 ...

对实验来说  时间不多 那就还是赶紧复苏 再来什么的   毕竟耗时而且细胞状态对实验结果有些影响肯定是有的
处理的话  你可以加四环素(浓度比网上的小点  有用 只是效果不算很好   好在容易找)或者汉恒生物的抗支药物(个人经历真心还行,就是差不多类一个星期就别用类  对细胞毒性也大  听说有适用装  问问 靠自己了)
处理其实就是自己经验的积累  别太较真就好 就当死马当活马类 (我说的是条件允许的情况  一切以实验为重的前提啊  就这一皿细胞了的话  那你就得上老大心了  嘿嘿)
祝好
10楼2016-03-23 09:26:35
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