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woaiguozhen

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物连接不上载体啊 已有7人参与

虫友们,片段大小7000,想连入PCI载体,尝试分段连入不行,直接连也不行,操作肯定没问题,请问有没有什么好的方法啊?
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指尖温暖

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以尽量降低载体的浓度,我是过夜摇一管5mL的载体,收菌1.5mL,提质粒洗脱时用50微升,在取30微升做50的酶切体系,洗脱用50微升,但是不要用割胶回收片段,直接用纯化试剂盒,(因为量少,跑胶看不到),正常连接体系,效率很高~
12楼2016-03-23 14:32:18
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查看全部 13 个回答

gaoboshi2015

捐助贵宾 (初入文坛)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容

小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先你要确定你的目的片段没问题。在确定你的目的片段没问题的情况下,要选择好的载体。比如这款TOPO无缝克隆载体:http://changyubio.com/product/277246233
2楼2016-03-21 20:23:57
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暮色西荷

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以试试先连接T载体

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-21 20:51:14
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2016-03-21 20:51:14
可以试试先连接T载体

7000连T载体可以吗?

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
4楼2016-03-22 01:25:04
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