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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物连接不上载体啊
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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woaiguozhen

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物连接不上载体啊 已有7人参与

虫友们，片段大小7000，想连入PCI载体，尝试分段连入不行，直接连也不行，操作肯定没问题，请问有没有什么好的方法啊？
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1楼 2016-03-21 14:56:16
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指尖温暖

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以尽量降低载体的浓度，我是过夜摇一管5mL的载体，收菌1.5mL，提质粒洗脱时用50微升，在取30微升做50的酶切体系，洗脱用50微升，但是不要用割胶回收片段，直接用纯化试剂盒，（因为量少，跑胶看不到），正常连接体系，效率很高~
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12楼2016-03-23 14:32:18
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gaoboshi2015

捐助贵宾 (初入文坛)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先你要确定你的目的片段没问题。在确定你的目的片段没问题的情况下，要选择好的载体。比如这款TOPO无缝克隆载体：http://changyubio.com/product/277246233。
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2楼2016-03-21 20:23:57
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暮色西荷

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以试试先连接T载体

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-03-21 20:51:14
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2016-03-21 20:51:14
可以试试先连接T载体

7000连T载体可以吗？

发自小木虫IOS客户端
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A right way maybe not a good way！
4楼2016-03-22 01:25:04
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